[發明專利]一種磁性稀土熒光微球的制備方法和用途

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• 申請號: 201810745036.0
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN109030439A
• 公開（公告）日: 2018-12-18
• 發明（設計）人: 于龍波;于永濤;黎權;劉日俊
• 申請（專利權）人: 廣州華澳生物科技有限公司
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64;G01N33/558;G01N33/577;C09K11/77;C09K11/02
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一種磁性稀土熒光微球的制備方法，所述磁性稀土熒光微球為高分子材料包裹磁性稀土熒光復合物的納米微球，所述磁性稀土熒光微球的直徑為10~500nm，熒光發射波長范圍為400~800nm；所述磁性稀土熒光微球包括高分子納米微球、納米微球表面修飾活性基團、磁性熒光復合物與磁性熒光納米微球。本發明所述的磁性稀土熒光微球具有磁性熒光雙標記功能、熒光強度高、穩定性好等優點，并且可以與免疫層析技術相結合，實現快速與定量的完美結合。

技術領域

本發明屬于納米材料、檢測技術領域，具體涉及一種磁性稀土熒光微球的制備方法和用途。

背景技術

磁性標記和熒光標記技術在生物分析、分離純化、醫學檢驗等領域有著廣泛的應用?；诖判约{米材料的磁性標記技術使得被標記物在外加磁場作用下具有良好的磁響應性能，一方面可以作為磁分離的介質，另一方面也可進行磁信號檢測。而以鑭系稀土元素、上轉換熒光材料、量子點等為代表的熒光納米材料標記技術，在熒光示蹤、定量熒光分析等領域有著廣泛的應用。制備熒光-磁性雙標記微球，將這兩種標記技術的優勢合二為一，一直是各國科研工作者共同關注的研究熱點。

發明內容

為解決以上問題，本發明提供一種兼備磁性和熒光功能的微球簡便制備方法，以及應用該磁性熒光雙標記微球結合免疫層析技術進行熒光免疫層析試紙條的制造使用方法。

為了達到本發明的目的，本發明技術方案如下：一種磁性稀土熒光微球的制備方法，所述磁性稀土熒光微球為高分子材料包裹磁性稀土熒光復合物的納米微球，所述磁性稀土熒光微球的直徑為10~500nm，熒光發射波長范圍為 400~ 800nm；所述磁性稀土熒光微球包括高分子納米微球、納米微球表面修飾活性基團、磁性熒光復合物與磁性熒光納米微球。

進一步，高分子材料為聚苯乙烯或聚烷基氰基丙烯酸酯。

進一步，磁性稀土熒光微球表面修飾活性基團為為氨基、羧基或巰基。

進一步，磁性熒光復合物為鐵氧化物和鑭系稀土元素復合物；所述所述鐵氧化物為四氧化三鐵、三氧化二鐵、氧化鐵、鐵氧體中任意一種或幾種混合；所述鑭系稀土元素為Eu3+、Sm3+、Tb3+、Nd3+或 Dy3+中任意一種或幾種混合。

一種磁性稀土熒光微球免疫層析定量檢測的方法，所述磁性稀土熒光微球免疫層析定量檢測步驟如下:

1) 用化學交聯分別將分析物對應的配體，以及質控分子，偶聯至磁性稀土熒光微球表面，得到標記液；

2) 以樣品墊、層析膜、吸水墊、PVC底板以及卡盒組裝免疫層析所用試紙條，其中層析膜上設定有測試線和質控線，測試線固定有能與分析物結合或與步驟1) 所述標記液競爭結合分析物的抗體，質控線固定有能與所述質控分子特異性結合的生物分子；

3) 將標記液與樣本混合，反應結束后進行磁分離，去上清并將富集物洗滌、復溶，獲得富集液 ；

4) 將富集液滴加于試紙條的樣品墊處，進行免疫層析，當富集液流經測試線和質控線后，檢測測試線和質控線的熒光信號強度，并以質控線熒光信號強度校正測試線的熒 光信號強度，進而實現對目標分析物的定量檢測。

進一步，配體包含抗原、半抗原、單克隆抗體、多克隆抗體和激素受體。

進一步，所述層析膜包含一條或一條以上質控線和一條或一條以上一條測試線，通過設置多條測試線和質控線分別測定一個樣本里的多種分析物。

進一步，所述目標分析物包括小分子、抗原、抗體、激素、抗生素、細菌、病毒及其他生化標志物。

進一步，其他生化標志物包括心血管標志物、腫瘤標志物或自身免疫性疾病標志物。

進一步，層析膜、PVC底板和卡盒在大于300nm 時熒光很弱或不含熒光劑。