[發(fā)明專利]一種琴葉榕總黃酮的提取純化方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810743496.X
• 申請(qǐng)日: 2018-07-09
• 公開（公告）號(hào): CN108653392A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭偉文;戴衛(wèi)波;羅清;鐘希文;邱雄泉;陸陽(yáng)存
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山市中醫(yī)院(廣州中醫(yī)藥大學(xué)附屬中山中醫(yī)院)
• 主分類號(hào): A61K36/60
• 分類號(hào): A61K36/60
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44253
• 代理人: 彭玲

本發(fā)明公開了一種琴葉榕總黃酮的提取純化方法，包括步驟：（a）將干燥的琴葉榕粉碎成粗粉；（b）取琴葉榕粗粉，以乙醇為提取溶劑，超聲破壁后，加熱回流提取，離心，上清液濃縮，離心，取上清液，備用；（c）將步驟（b）的上清液，用大孔樹脂吸附，依次用純化水、50?70%乙醇洗脫，收集50?70%乙醇洗脫液，濃縮至干，即得琴葉榕總黃酮。本發(fā)明是以琴葉榕為原料，先經(jīng)乙醇超聲破壁，再結(jié)合乙醇加熱回流提取，提取液減壓回收溶劑，離心除去沉淀，再通過(guò)優(yōu)化大孔吸附樹脂純化工藝，經(jīng)提取純化得到的琴葉榕總黃酮的純度可達(dá)到為30%以上，提取工藝簡(jiǎn)單，分離純化效率高，藥材利用率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種琴葉榕總黃酮的提取純化方法。

背景技術(shù)

琴葉榕來(lái)源于桑科榕屬植物琴葉榕Ficus pandurata Hance，以根、葉入藥，其性溫，味甘、微辛，具有祛風(fēng)除濕、解毒消腫、行氣、活血調(diào)經(jīng)、舒筋通絡(luò)、療瘧、通乳汁的功效。民間常以琴葉榕單味藥或復(fù)方用藥的形式治療跌打損傷、月經(jīng)不調(diào)、腰酸背痛、黃疸、乳癰、瘧疾、乳腺炎、胃痛、百日咳、毒蛇咬傷、濕熱中阻，惡心不欲食之證等。

現(xiàn)代文獻(xiàn)研究中，草藥琴葉榕的主要化學(xué)成分有三萜類、黃酮類、香豆素類、酚酸類等，其中，黃酮類成分作為科學(xué)界公認(rèn)的具有抗氧化活性的成分中的一類，可用來(lái)預(yù)防和治療由氧化應(yīng)激引起的諸多疾病。目前尚未見(jiàn)琴葉榕總黃酮提取純化工藝方面的相關(guān)研究與報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的首要目的在于提供一種琴葉榕總黃酮的提取純化方法，該提取工藝簡(jiǎn)單，分離純化效率高，藥材利用率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。

本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

一種琴葉榕總黃酮的提取純化方法，包括如下步驟：

（a）將干燥的琴葉榕粉碎成粗粉；

（b）取琴葉榕粗粉，以乙醇為提取溶劑，超聲破壁后，加熱回流提取，提取液濃縮，離心，取上清液，備用；

（c）將步驟（b）的上清液，用大孔樹脂吸附，依次用純化水、50-70%乙醇洗脫，收集50-70%乙醇洗脫液，濃縮至干，即得琴葉榕總黃酮。

優(yōu)選的，步驟a）中，將干燥的琴葉榕粉碎成粗粉，過(guò)40-80目篩即可。

優(yōu)選的，步驟b）中，所述乙醇的質(zhì)量濃度為50-70%，用量為琴葉榕粗粉的5-10倍量，超聲破壁的溫度為25-40℃，超聲破壁的時(shí)間為20-40min，加熱回流提取方式為90-100℃水浴回流提取2-3次，每次1-3h。

為保證提取效果，本發(fā)明對(duì)步驟（b）的提取工藝參數(shù)進(jìn)行了優(yōu)化，具體如下：

（1）乙醇濃度的考察

精密稱取5g琴葉榕根的粗粉，共5份，選取40%、50%、60%、70%、80%五個(gè)乙醇濃度進(jìn)行考察，固液比為1:6，30℃條件下超聲破壁30min后， 95℃水浴加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液過(guò)濾，濃縮得干浸膏，以甲醇溶解并定容至100mL，備用。紫外分光光度法制備蘆丁標(biāo)準(zhǔn)曲線并計(jì)算各浸膏溶液中總黃酮的含量，結(jié)果發(fā)現(xiàn)50%乙醇提取液所得浸膏中總黃酮含量最大，為41.82mg/g，故優(yōu)選50%乙醇作為提取溶劑。

（2）乙醇用量的考察

精密稱取5g琴葉榕根的粗粉，共3份，50%乙醇作為提取溶劑，選取固液比為1:6、1:8、1:10進(jìn)行考察，30℃條件下超聲破壁30min后，95℃水浴加熱回流3次，每次2h，合并提取液過(guò)濾，濃縮得干浸膏，以甲醇溶解并定容至100mL，備用。結(jié)果發(fā)現(xiàn)三個(gè)固液比條件下所得總黃酮含量均在17±1mg范圍內(nèi)，故優(yōu)選為1:6固液比。

（3）加熱回流提取溫度的考察