[發明專利]一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白及其應用

在審

• 申請號: 201810741648.2
• 申請日: 2018-07-09
• 公開（公告）號: CN108977420A
• 公開（公告）日: 2018-12-11
• 發明（設計）人: 張耀洲;吳玉乾;馮建華;李冬梅;張樹軍;陳玉皎;王文雅
• 申請（專利權）人: 天津市湖濱盤古基因科學發展有限公司
• 主分類號: C12N9/24
• 分類號: C12N9/24;C12N15/56;C12Q1/6886;C07K16/40;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/573
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• 代理人: 暫無信息

本發明涉及一種人的溶酶體α?甘露糖苷酶突變蛋白及其應用，將若干白血病患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的溶酶體α?甘露糖苷酶的突變蛋白，根據該人的溶酶體α?甘露糖苷酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為白血病的基因診斷提供指引作用，為實現白血病的診斷和治療提供科學基礎。

技術領域

本發明涉及一種基因工程領域，尤其涉及一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白及其應用。

背景技術

溶酶體α-甘露糖苷酶(lysosomal alpha-mannosidase isoform X2)是糖蛋白降解途徑的主要外糖苷酶，并參與糖蛋白的回收利用。該酶若發生缺陷會導致糖蛋白不能有效降解，大量寡糖在溶酶體中積聚，從而使機體發生廣泛的病理變化，臨床上稱為溶酶體α-甘露糖苷貯積癥。

近期研究發現，溶酶體α-甘露糖苷酶與白血病的發生也有一定的關系，因此，對人的溶酶體α-甘露糖苷酶進行檢測為人體是否患有白血病提供一定的指引作用。

發明內容

本發明目的在于提供一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白及其應用。

本發明技術方案包括：

第一方面，提供一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白，其氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

第二方面，提供一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶的突變蛋白的編碼基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。

第三方面，提供一種基因芯片，包括：固相載體和固定在該載體上的核苷酸探針；所述核苷酸探針根據上述所述人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白的核苷酸序列，與人的溶酶體α-甘露糖苷酶正常蛋白的核苷酸序列的比對結果確定。

優選地，所述核苷酸探針為SEQ ID NO:3所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:4所示的堿基序列；

所述核苷酸探針為SEQ ID NO:5所示的堿基序列。

第四方面，提供一種特異性識別人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白的單克隆抗體，其可與SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列特異性結合。

第五方面，提供一種用于檢測人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白的抗體的ELISA試劑盒，所述ELISA試劑盒包括：包被有上述單克隆抗體的ELISA酶標板、酶標二抗、檢測對象的溶酶體α-甘露糖苷酶蛋白、樣品稀釋液、包被緩沖液、ELISA酶標板洗滌液、顯色液和終止液。

優選地，所述酶標二抗為稀釋的HRP辣根過氧化物酶標記的山羊抗人IgG。

本發明提供了一種人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白及其應用，將若白血病患者作為研究病例，對病例進行基因檢測并分析，確定出人的溶酶體α-甘露糖苷酶的突變蛋白，根據該人的溶酶體α-甘露糖苷酶突變蛋白制備基因芯片、單克隆抗體和ELISA試劑盒，為白血病的基因診斷提供指引作用，為實現白血病的診斷和治療提供科學基礎。

上述說明僅是本發明技術方案的概述，為了能夠更清楚了解本發明的技術手段，并可依照說明書的內容予以實施，以下以本發明的較佳實施例并配合附圖詳細說明如后。

附圖說明

圖1是本發明實施例一提供的一種比對結果示意圖；

圖2是本發明實施例一提供的一種基因芯片布局圖；

圖3是本發明實施例二提供的一種顯色結果示意圖；

圖4是本發明實施例二提供的另一種顯色結果示意圖；

圖5是本發明實施例五提供的蛋白含量的標準曲線；