[發明專利]一種裂解-氣相色譜指紋圖譜鑒別浙貝母、川貝母和平貝母的方法

在審

• 申請號: 201810736890.0
• 申請日: 2018-07-06
• 公開（公告）號: CN108845069A
• 公開（公告）日: 2018-11-20
• 發明（設計）人: 劉會君;陳雪;黃忠平;黃翌磊;王麗麗
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/54
• 代理公司: 杭州天正專利事務所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王兵

1.一種裂解氣相色譜法結合指紋圖譜鑒別浙貝母、川貝母和平貝母的方法，其特征在于：所述方法按照如下步驟進行制備：

(1)取已知浙貝母、川貝母和平貝母樣品，所述的浙貝母、川貝母、平貝母分別取5-6個樣品，一共取n個樣品，n為整數，15≤n≤18；

(2)分別將所述的樣品烘干、研磨，得到各樣品的貝母粉末60-100目，分別裝入裂解器中，將裂解器連接氣相色譜儀進樣口，當裂解器溫度達到400-500℃時進樣，經過極性色譜柱分離檢測得到貝母裂解氣相色譜圖；

所述氣相色譜條件為：色譜柱為極性柱；柱箱升溫程序為初溫40～50℃，以10～20℃/min速率升到250℃，保持5～10min；進樣口溫度為240～260℃，檢測器溫度為240～260℃，分流比30～50:1；載氣為氮氣，流速1.0mL/min；

所述裂解器條件：裂解爐溫度：400-500℃；裂解器與氣相色譜儀接口溫度240～260℃；

(3)將待鑒定的貝母樣品按照步驟(2)所述的樣品檢測相同條件進行操作，得到待鑒定的貝母氣相色譜圖；

(4)取所述n個已知樣品的氣相色譜圖，選取每個樣品共有的M個特征成分的特征峰、M為整數，20≤M≤40，并且所述每個樣品的M個特征峰的總面積達到該樣品所有峰總面積的90％，在所述的M個特征峰內，選取一個分離較好，峰面積較大、保留時間居中且相對強度較穩定的峰為參照峰，分別求M個特征成分的特征峰與參照峰的相對峰面積，得到M×n的數據庫，輸入SPSS統計軟件進行主成分分析或聚類分析，得到主成分分析散點圖或聚類分析圖，并在所述的主成分分析散點圖或聚類分析圖上確定浙貝母、川貝母或平貝母各自的區域；然后取所述的待鑒定的貝母氣相色譜圖，分別計算所述M個特征成分的特征峰與所述參照峰的相對峰面積，輸入SPSS統計軟件進行主成分分析或聚類分析，得到所述待鑒定的貝母主成分分析散點圖或聚類分析圖，根據統計分析結果將待鑒別樣品歸類為浙貝母、川貝母或平貝母。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(4)中，所述主成分分析按以下方法進行：

取n個已知樣品的氣相色譜圖，分別計算出每個已知樣品的M個特征成分的特征峰相對于所述參照峰的相對峰面積數據，得到M×n的數據庫，輸入SPSS統計軟件進行主成分分析，提取得到3個主成分為三維主成分，得到每種樣品的三維主成分坐標，并由此做出已知樣品的三維主成分分析散點圖；三維主成分分析散點圖上浙貝母、川貝母或平貝母樣品分別占三個區域，分別為浙貝母、川貝母或平貝母；

取待鑒別樣品的氣相色譜圖，計算待鑒定樣品的M個特征成分的特征峰相對于所述參照峰的相對峰面積的數據，輸入SPSS統計軟件進行主成分分析，提取得到相應待鑒別樣品的三維主成分，根據待鑒別樣品的三維主成分坐標在所述三維主成分分析散點圖中的位置與已知浙貝母、川貝母或平貝母樣品所在區域最接近的，即為該區域相對應的品種的貝母。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(4)中，所述聚類分析按以下方法進行：

取n個已知樣品的氣相色譜圖，分別計算每個已知樣品的M個特征成分的特征峰相對于所述參照峰的相對峰面積數據，得到M×n的數據庫，輸入SPSS統計軟件進行聚類分析，每兩樣本間用離差平方和Ward’s法連接，以平方歐式距離作為計算方式，輸出已知樣品的聚類分析圖，由圖中可知，浙貝母、川貝母或平貝母樣品分為三類；

取待鑒別樣品的氣相色譜圖，計算待鑒定樣品M個特征成分的特征峰相對于所述參照峰的相對峰面積數據，輸入SPSS統計軟件進行聚類分析，每兩樣本間用離差平方和Ward’s法連接，以平方歐式距離作為計算方式，輸出所述待鑒別樣品聚類分析圖，根據待鑒別樣品在聚類分析圖中的歸類位置與所述浙貝母、川貝母或平貝母樣品聚為一類的，即將待鑒別樣品歸類為該貝母樣品。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述裂解器溫度達到400～500℃時進樣。

5.如權利要求5所述的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述貝母粉末為80-100目的粉末。

6.如權利要求5所述的方法，其特征在于：步驟(2)中，所述貝母粉末按如下方法獲得：將貝母干燥鱗莖中肉眼可見的根須等雜質剔除，于60℃下烘干3小時，取出冷卻至室溫后研磨，過80～100目篩，制成貝母粉末。