[發(fā)明專利]一種氟乙酸脫鹵酶突變體及其應(yīng)用在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810731688.9 | 申請日： | 2018-07-05 |
| 公開（公告）號： | CN110564706A | 公開（公告）日： | 2019-12-13 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 瞿旭東;程占冰;丁少南;徐艷冰;黃瑤 | 申請（專利權(quán)）人： | 上海弈柯萊生物醫(yī)藥科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N9/14 | 分類號： | C12N9/14;C12N15/55;C12P41/00;C12P7/52;C12P7/42 |
| 代理公司： | 31283 上海弼興律師事務(wù)所 | 代理人： | 薛琦;朱水平 |
| 地址： | 200241 上海市*** | 國省代碼： | 上海;31 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 氟乙酸 脫鹵酶 突變體 溴丁酸 氨基酸殘基 底物 突變 立體選擇性 生產(chǎn)成本低 催化溴化 羥基丁酸 制備 應(yīng)用 | ||
1.一種氟乙酸脫鹵酶突變體，其特征在于，所述氟乙酸脫鹵酶突變體的序列包括將SEQID NO.1所示的第155位氨基酸殘基H、和/或第156位氨基酸殘基W進行突變后的序列；所述氟乙酸脫鹵酶突變體具有催化溴化底物、尤其是2-溴丁酸底物的活性。
2.如權(quán)利要求1所述的氟乙酸脫鹵酶突變體，其特征在于，所述氟乙酸脫鹵酶突變體的序列包括將SEQ ID NO.1所示的第155位氨基酸殘基H、和/或第156位氨基酸殘基W突變?yōu)樘烊话被釟埢蟮男蛄?；較佳地，所述氟乙酸脫鹵酶突變體的序列還包括將SEQ ID NO.1所示的第219位氨基酸殘基Y突變?yōu)樘烊话被釟埢蟮男蛄小?/p>
3.如權(quán)利要求1或2所述的氟乙酸脫鹵酶突變體，其特征在于，所述第155位氨基酸殘基H突變?yōu)锳、C、D、E、F、G、I、L、M、N、P、Q、S、T、V或W，和/或，第156位氨基酸殘基W突變?yōu)锳、C、D、F、G、I、L、M、P、R、S、T、V或Y，和/或，第219位氨基酸殘基Y突變?yōu)槭杷园被釟埢?/p>
較佳地，所述第155位氨基酸殘基H突變?yōu)镮、N、V、F、L、Q、A、C、M、P、T或W，和/或，第156位氨基酸殘基W突變?yōu)镕、M、R、S、T、G、L、A、C、D、I或Y，和/或，第219位氨基酸殘基Y突變?yōu)镕、L或M；
更佳地，所述第155位氨基酸殘基H突變?yōu)镮、N或V，和/或，第156位氨基酸殘基W突變?yōu)镕、M、R、S或T，和/或，第219位氨基酸殘基Y突變?yōu)镕、L或M。
4.如權(quán)利要求1～3任一項所述的氟乙酸脫鹵酶突變體，其特征在于，所述第155位氨基酸殘基H突變?yōu)閂，
或第156位氨基酸殘基W突變?yōu)镸、T、C、F、S、V、A或L。
5.如權(quán)利要求1～4任一項所述的氟乙酸脫鹵酶突變體，其特征在于，所述氟乙酸脫鹵酶突變體的氨基酸序列如SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13、SEQID NO.15、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.19、SEQ ID NO.21、SEQ ID NO.23、SEQ ID NO.25、SEQID NO.27、SEQ ID NO.29、SEQ ID NO.31、SEQ ID NO.33、SEQ ID NO.35、SEQ ID NO.37、SEQID NO.39、SEQ ID NO.41、SEQ ID NO.43、SEQ ID NO.45、SEQ ID NO.47、SEQ ID NO.49、SEQID NO.51、SEQ ID NO.53、SEQ ID NO.55、SEQ ID NO.57、SEQ ID NO.59、SEQ ID NO.61、SEQID NO.63、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO.67、SEQ ID NO.69、SEQ ID NO.71、SEQ ID NO.73、SEQID NO.75、SEQ ID NO.77、SEQ ID NO.79、SEQ ID NO.81、SEQ ID NO.83、SEQ ID NO.85、SEQID NO.87、SEQ ID NO.89、SEQ ID NO.91、SEQ ID NO.93、SEQ ID NO.95、SEQ ID NO.97、SEQID NO.99、SEQ ID NO.101、SEQ ID NO.103、SEQ ID NO.105、SEQ ID NO.107、SEQ IDNO.109、SEQ ID NO.111、SEQ ID NO.113、SEQ ID NO.115、SEQ ID NO.117、SEQ ID NO.119、SEQ ID NO.121、SEQ ID NO.123、SEQ ID NO.125、SEQ ID NO.127、SEQ ID NO.129所示；較佳地，所述氟乙酸脫鹵酶突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.10、SEQ IDNO.12、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.16、SEQ ID NO.18、SEQ ID NO.20、SEQ ID NO.22、SEQ IDNO.24、SEQ ID NO.26、SEQ ID NO.28、SEQ ID NO.30、SEQ ID NO.32、SEQ ID NO.34、SEQ IDNO.36、SEQ ID NO.38、SEQ ID NO.40、SEQ ID NO.42、SEQ ID NO.44、SEQ ID NO.46、SEQ IDNO.48、SEQ ID NO.50、SEQ ID NO.52、SEQ ID NO.54、SEQ ID NO.56、SEQ ID NO.58、SEQ IDNO.60、SEQ ID NO.62、SEQ ID NO.64、SEQ ID NO.66、SEQ ID NO.68、SEQ ID NO.70、SEQ IDNO.72、SEQ ID NO.74、SEQ ID NO.76、SEQ ID NO.78、SEQ ID NO.80、SEQ ID NO.82、SEQ IDNO.84、SEQ ID NO.86、SEQ ID NO.88、SEQ ID NO.90、SEQ ID NO.92、SEQ ID NO.94、SEQ IDNO.96、SEQ ID NO.98、SEQ ID NO.100、SEQ ID NO.102、SEQ ID NO.104、SEQ ID NO.106、SEQ ID NO.108、SEQ ID NO.110、SEQ ID NO.112、SEQ ID NO.114、SEQ ID NO.116、SEQ IDNO.118、SEQ ID NO.120、SEQ ID NO.122、SEQ ID NO.124、SEQ ID NO.126、SEQ ID NO.128、SEQ ID NO.130所示。
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