[發(fā)明專利]一種抗原多肽和包含該抗原多肽的試劑盒有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810724831.1 | 申請日： | 2018-07-04 |
| 公開（公告）號： | CN108896768B | 公開（公告）日： | 2020-07-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 葉建強;申秋平;邵紅霞;秦愛建;路浩;王偉康;張建軍 | 申請（專利權(quán)）人： | 揚州大學 |
| 主分類號： | C07K14/075 | 分類號： | C07K14/075;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 225000 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 抗原 多肽 包含 試劑盒 | ||
本發(fā)明提供了一種抗原多肽，屬于生物技術(shù)檢測技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明提供的抗原多肽能夠檢測血清中的非結(jié)構(gòu)蛋白52K抗體，進而能夠檢測FAdV?4病毒感染，而且能夠區(qū)別自然感染以及滅活疫苗免疫雞群。
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及生物技術(shù)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抗原多肽和包含該抗原多肽的試劑盒。
背景技術(shù)
血清4型禽腺病毒(FAdV-4)屬于禽腺病毒屬，近年來，國內(nèi)雞群由FAdV-4引起的包涵體肝炎、心包積液病例逐漸增多。FAdV-4不僅感染3～7周齡肉雞，還感染10～20周齡的蛋雞，給養(yǎng)雞業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟損失。由于滅活疫苗的研制及應用，今后如何來鑒別雞群是自然感染還是處于免疫狀態(tài)，對FAdV-4有效及時防控至關(guān)重要。病毒的非結(jié)構(gòu)蛋白一般只在病毒感染的細胞中表達，而在全整的成熟病毒顆粒中是不存在的。因此，在活病毒感染機體后，由于可產(chǎn)生非結(jié)構(gòu)蛋白，一般能誘導機體產(chǎn)生針對非結(jié)構(gòu)蛋白的特異性抗體；而病毒滅活疫苗中由于不存在非結(jié)構(gòu)蛋白，免疫機體后一般也不產(chǎn)生針對非結(jié)構(gòu)蛋白的抗體。所以針對某些非結(jié)構(gòu)蛋白抗體的檢測能夠鑒別雞群是自然感染還是處于滅活疫苗免疫狀態(tài)。雖然國內(nèi)外有學者利用血清1型禽腺病毒(FAdV-1)的非結(jié)構(gòu)蛋白33K和100K，建立了可區(qū)分FAdV-1自然感染和滅活疫苗接種雞群的ELISA方法，但目前尚無基于非結(jié)構(gòu)蛋白檢測FAdV-4。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種抗原多肽，能夠檢測血清中的非結(jié)構(gòu)蛋白52K抗體，進而能夠檢測FAdV-4病毒感染。
本發(fā)明提供了一種抗原多肽，所述抗原多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列。
本發(fā)明還提供了一種試劑盒，包括上述技術(shù)方案所述抗原多肽、辣根過氧化物酶標記的兔抗雞IgG、洗滌液、陽性對照、陰性對照、稀釋液、封閉液和硫酸溶液。
優(yōu)選的，所述洗滌液包括PBS緩沖液和吐溫-20，所述PBS緩沖液的pH值為7.4，所述PBS緩沖液與吐溫-20的體積比為(900～1100):(0.4～0.6)。
優(yōu)選的，所述稀釋液包括PBS緩沖液、吐溫-20和牛血清白蛋白，所述PBS緩沖液的pH值為7.4，所述PBS緩沖液的體積與吐溫-20的體積、牛血清白蛋白的質(zhì)量比為(900～1100)ml:(0.4～0.6)ml:(15～25)g。
優(yōu)選的，所述封閉液包括PBS緩沖液和牛血清白蛋白，所述PBS緩沖液的pH值為7.4，所述PBS緩沖液與牛血清白蛋白的質(zhì)量比為(90～110)ml:(1～3)g。
優(yōu)選的，所述硫酸溶液的濃度為1～3mol/L。
優(yōu)選的，所述陽性對照包括抗FAdV-4病毒的禽類血清。
優(yōu)選的，所述陰性對照包括SPF禽類血清。
本發(fā)明提供了一種抗原多肽，本發(fā)明以FAdV-4的非結(jié)構(gòu)蛋白中的52K為靶點，合成所述抗原多肽，通過檢測FAdV-4中的非結(jié)構(gòu)蛋白52K蛋白抗體來檢測FAdV-4感染。
本發(fā)明實施例的結(jié)果顯示：本發(fā)明提供的抗原多肽能夠檢測血清中的非結(jié)構(gòu)蛋白52K抗體，進而能夠檢測FAdV-4病毒感染，而且能夠區(qū)別自然感染以及滅活疫苗免疫雞群。
附圖說明
圖1為非結(jié)構(gòu)蛋白52K不同肽段與FAdV-4人工感染雞陽性血清反應性；
圖2為ELISA特異性試驗。
具體實施方式
本發(fā)明提供了一種抗原多肽，所述抗原多肽具有SEQ ID No.1所示的氨基酸序列，具體序列如下所示：
KAKPDTVPQGDYDRDMMYRSGQV。
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