[發(fā)明專利]野生大豆相關(guān)蛋白在提高植物抗蟲性中的應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810721984.0
• 申請日: 2018-07-04
• 公開（公告）號: CN108795975B
• 公開（公告）日: 2021-10-22
• 發(fā)明（設計）人: 沈欣杰;王巖巖;矯永慶;張永興;周新安;郭葳
• 申請（專利權(quán)）人: 中國農(nóng)業(yè)科學院油料作物研究所
• 主分類號: C12N15/82
• 分類號: C12N15/82;C07K14/415;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 北京紀凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;白艷

本發(fā)明公開了野生大豆相關(guān)蛋白在提高植物抗蟲性中的應用。本發(fā)明提供了1)?3)中任一種物質(zhì)在調(diào)控植物抗蟲性中的應用：1)蛋白GSMYB15；2)編碼蛋白GSMYB15的DNA分子；3)含有編碼蛋白GSMYB15的DNA分子的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌；實驗證明，與未轉(zhuǎn)GsMYB15基因的植株相比，GsMYB15轉(zhuǎn)基因植株具有顯著的抗蟲性，說明GsMYB15基因具有植物抗蟲性。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及野生大豆相關(guān)蛋白在提高植物抗蟲性中的應用。

背景技術(shù)

大豆是世界性的重要食用油和優(yōu)質(zhì)植物蛋白質(zhì)來源。栽培大豆在整個生長發(fā)育過程中除了面對土壤肥力，光照和水分等非生物環(huán)境因素的影響外還受到多種昆蟲的侵害。其中，食葉性害蟲由于對大豆葉片具有啃食性可以短時間內(nèi)造成大豆植株葉片的巨大損失，導致大豆失去主要的光合作用場所從而造成大豆減產(chǎn)，嚴重的甚至絕收。傳統(tǒng)的雜交育種由于缺乏優(yōu)質(zhì)的抗蟲親本材料導致大豆抗食葉性害蟲雜交育種一直比較滯后。野生大豆是栽培大豆的近緣種，野生大豆具有良好的抗逆性狀，但是由于野生大豆種子小，且植株形態(tài)和栽培大豆相比差異較大一般不能直接用于雜交育種。同時，傳統(tǒng)的雜交育種需要不斷地利用親本組合，從下一代中選出具有優(yōu)良抗性的后代進行繁育篩選，這種方法費時費力，工作量非常大。利用現(xiàn)代轉(zhuǎn)基因技術(shù)可以快速的將具有確定抗蟲性功能的基因特定導入到栽培大豆中，即可獲得具有抗蟲性的優(yōu)良轉(zhuǎn)基因栽培大豆。這種方法簡單，快速，具有明顯的優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個目的是提供如下1)-3)中任一種物質(zhì)的用途。

本發(fā)明提供了1)-3)中任一種物質(zhì)在調(diào)控植物抗蟲性中的應用：

1)蛋白GSMYB15；

2)編碼蛋白GSMYB15的DNA分子；

3)含有編碼蛋白GSMYB15的DNA分子的重組載體、表達盒、轉(zhuǎn)基因細胞系或重組菌；

所述蛋白GSMYB15為如下(1)或(2)：

(1)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

(2)將序列表中序列1所示的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由(1)衍生的蛋白質(zhì)。

上述應用中，所述DNA分子是如下1)-3)中任一種的DNA分子：

1)編碼區(qū)為序列表中序列2所示的DNA分子；

2)在嚴格條件下與1)限定的DNA序列雜交且編碼具有相同功能蛋白質(zhì)的DNA分子；

3)與1)限定的DNA序列至少具有70％、至少具有75％、至少具有80％、至少具有85％、至少具有90％、至少具有95％、至少具有96％、至少具有97％、至少具有98％或至少具有99％同源性且編碼具有相同功能蛋白質(zhì)的DNA分子。

上述嚴格條件是在2×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下雜交并洗膜2次，每次5min，又于0.5×SSC，0.1％SDS的溶液中，在68℃下雜交并洗膜2次，每次15min；或，0.1×SSPE(或0.1×SSC)、0.1％SDS的溶液中，65℃條件下雜交并洗膜。

上述應用中，所述調(diào)控植物抗蟲性為提高植物抗蟲性。

上述應用中，所述植物為雙子葉植物或單子葉植物；

或所述植物為雙子葉植物，所述雙子葉植物具體為十字花科植物；所述十字花科植物具體為擬南芥；

或所述蟲為棉鈴蟲。

上述1)-3)中任一種物質(zhì)在培育抗蟲植物中的應用也是本發(fā)明保護的范圍；