[發(fā)明專利]一種治療組織損傷的細(xì)胞凝膠制劑及其用途和所用的保持凍存細(xì)胞活性的凝膠溶液

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810721181.5
• 申請日: 2018-07-04
• 公開（公告）號: CN108619086A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓之波;賈紅紅;趙夢;趙欽軍;馮影;韓忠朝
• 申請（專利權(quán)）人: 天津昂賽細(xì)胞基因工程有限公司
• 主分類號: A61K9/06
• 分類號: A61K9/06;A61K47/36;A61K47/42;A61K35/28;A61P1/00;A61P17/02;A61P3/10
• 代理公司: 天津才智專利商標(biāo)代理有限公司 12108
• 代理人: 王曉紅

本發(fā)明公開了一種治療組織損傷的細(xì)胞凝膠制劑及其用途和所用的保持凍存細(xì)胞活性的凝膠溶液,細(xì)胞凝膠制劑的配方為：按體積百分比，凝膠溶液為50％～90％：復(fù)方電解質(zhì)和/或氨基酸注射液細(xì)胞重懸液為10％～50％，每毫升細(xì)胞凝膠制劑中含有0.5×10⁵～2×10⁷個(gè)細(xì)胞。凝膠溶液包括下述質(zhì)量與體積組分1～50mg高分子材料穩(wěn)定劑，40～160ul丙三醇，20～150mg人血白蛋白，20～120mg羥乙基淀粉，復(fù)方電解質(zhì)注射液和/或氨基酸注射液0.84～0.96ml。該凝膠制劑生物相容性好，不含有二甲基亞砜(DMSO)且能直接進(jìn)行低溫保存，制備操作簡便，?80℃儲存能夠長期穩(wěn)定的維持細(xì)胞的高活性，可以作為皮膚損傷、瘺道和粘膜損傷等創(chuàng)面的治療應(yīng)用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)和生物醫(yī)藥領(lǐng)域，特別涉及一種治療組織損傷的細(xì)胞凝膠制劑及其用途和所用的保持凍存細(xì)胞活性的凝膠溶液。

背景技術(shù)

皮膚是人體面積最大的器官，是人體的天然屏障，它直接與外界環(huán)境接觸，是機(jī)體免于脫水和感染的第一道防線。創(chuàng)面修復(fù)是創(chuàng)傷修復(fù)的難點(diǎn)，而大面積難愈性創(chuàng)面的修復(fù)是臨床治療的一大難題。研究表明，干細(xì)胞可以通過復(fù)合機(jī)制(包括促進(jìn)細(xì)胞分化，旁分泌細(xì)胞因子，并能促血管化)來影響局部組織微環(huán)境，促進(jìn)血管形成和誘導(dǎo)肉芽組織生成從而更好的促進(jìn)傷口愈合，有效地縮短治療的時(shí)間。特定條件下，利用干細(xì)胞的可塑性，可以誘導(dǎo)分化出脂肪干細(xì)胞，表皮干細(xì)胞等，應(yīng)用干細(xì)胞還可以重建皮脂腺，毛囊以及汗腺，減少瘢痕形成，從而形成皮膚功能的修復(fù)，表皮干細(xì)胞(ESC)在皮膚形成愈合過程中起著重要的作用，表皮干細(xì)胞能保持增殖分化能力，可以分化為表皮中的各種細(xì)胞，另外，毛囊干細(xì)胞不僅能轉(zhuǎn)換成毛囊組織內(nèi)的多種細(xì)胞類型，還能遷移到皮膚表面，形成表皮細(xì)胞。而單純地細(xì)胞懸液在傷口處保持細(xì)胞活性的時(shí)間較短，不能保證盡可能多的活的干細(xì)胞發(fā)揮其作用，盡可能長時(shí)間維持干細(xì)胞在創(chuàng)面的活性使其發(fā)揮成為一個(gè)熱點(diǎn)。除此皮膚表面的創(chuàng)傷，瘺是正常情況下不連接器官或動脈之間的異常鏈接或通道，可以發(fā)生在身體的多個(gè)部位，如肛瘺，子宮頸瘺，腸陰道瘺，子宮腹膜瘺等。克羅恩病和潰瘍性結(jié)腸炎是形成直腸瘺，腸瘺，腸皮膚瘺的主要病因，克羅恩病中所報(bào)道的瘺發(fā)生率為17％至50％，但對此病中瘺的治療是極具挑戰(zhàn)性的問題，很多療法對此類瘺的治療效果不佳，且復(fù)發(fā)率較高，使得受累患者非常痛苦，顯著降低了生活質(zhì)量。尋找一種新的有效的治療方法是目前臨床上亟待解決的問題。

間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)是中胚層來源的具有高度自我更新能力和多項(xiàng)分化潛能的多能干細(xì)胞，廣泛存在于全身多種組織中。間充質(zhì)干細(xì)胞是多能干細(xì)胞，具有“橫向分化”或“跨系分化”的能力，能支持造血干細(xì)胞的生長，還可以在不同的誘導(dǎo)條件下，在體外分化為多種組織細(xì)胞，可以作為理想的種子細(xì)胞用于病變和衰老引起的組織器官損傷修復(fù)。間充質(zhì)干細(xì)胞為貼壁細(xì)胞，在表面生長較好，能夠釋放促進(jìn)多種生長因子，并且可以抑制炎癥發(fā)生，并具有多項(xiàng)分化的能力，直接接觸創(chuàng)面或瘺道可以最大程度的發(fā)揮干細(xì)胞的修復(fù)治療作用，能更有效的減輕病人的痛苦，擁有廣闊的經(jīng)濟(jì)效益和社會效益。

細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一,凍存后細(xì)胞-196℃液氮中低溫保存，可以長期穩(wěn)定的保存細(xì)胞的特性，且適度的保存一定量細(xì)胞，可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞污染等使細(xì)胞丟種，起到保種的作用，目前所應(yīng)用的常規(guī)細(xì)胞凍存保護(hù)劑是二甲基亞砜(DMSO),但是DMSO會調(diào)節(jié)細(xì)胞的水分代謝，通過調(diào)節(jié)滲透壓影響細(xì)胞的生長狀態(tài)，在一定程度上會誘發(fā)細(xì)胞凋亡，制備中需要盡可能的減少復(fù)蘇后細(xì)胞與DMSO的接觸，給制備過程增加的一定的難度。DMSO易揮發(fā)，對人體具有一定的毒性，對眼睛有刺激作用，使用過程中，對操作設(shè)備和環(huán)境的要求較高。

發(fā)明內(nèi)容