[發(fā)明專利]一種中藥中赭曲霉毒素A的流式磁球檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810707250.7
• 申請(qǐng)日: 2018-07-02
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN110672852A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-01-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孔維軍;肖昌彬;楊美華;劉曉菲;廖曉芳
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所
• 主分類號(hào): G01N33/68
• 分類號(hào): G01N33/68;G01N33/577;G01N33/533;G01N21/64
• 代理公司: 11472 北京方安思達(dá)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司
• 代理人: 陳琳琳;張紅生

1.一種中藥中赭曲霉毒素A的流式磁球檢測(cè)方法，所述檢測(cè)方法包括以下步驟：

1)磁性熒光微球偶聯(lián)牛血清白蛋白-赭曲霉毒素A復(fù)合物的制備：

以磁性熒光微球?yàn)檩d體，在其表面偶聯(lián)牛血清白蛋白-赭曲霉毒素A，得到磁性熒光微球-牛血清白蛋白-赭曲霉毒素A復(fù)合物；

2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制定：利用不同濃度的OTA標(biāo)準(zhǔn)品建立標(biāo)準(zhǔn)曲線；

3)中藥中赭曲霉毒素A的檢測(cè)：

中藥樣品提取液加入赭曲霉毒素A單克隆抗體，孵育，再加入磁性熒光微球-牛血清白蛋白-赭曲霉毒素A復(fù)合物作為捕獲探針，孵育，磁吸附分離富集、洗滌后再加入異硫氰酸熒光素標(biāo)記羊抗小鼠二抗作為熒光信號(hào)探針，經(jīng)免疫反應(yīng)，再次磁吸附分離富集、洗滌后采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)磁性熒光微球表面的熒光強(qiáng)度，計(jì)算磁性熒光微球表面的熒光強(qiáng)度抑制率，依據(jù)繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線和磁性熒光微球表面抑制率計(jì)算出中藥樣品中赭曲霉毒素A的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥中赭曲霉毒素A的流式磁球檢測(cè)方法，其特征在于，步驟1)中，所述磁性熒光微球直徑為6.20μm，其表面帶有羧基活性功能基團(tuán)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥中赭曲霉毒素A的流式磁球檢測(cè)方法，其特征在于，步驟1)中，在碳化二亞胺和N-羧基琥珀酰亞胺鹽酸鹽存在條件下，在載體表面共價(jià)偶聯(lián)牛血清白蛋白-赭曲霉毒素A。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥中赭曲霉毒素A的流式磁球檢測(cè)方法，其特征在于，所述中藥為麥芽。