[發明專利]一種豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法

在審

• 申請號: 201810697435.4
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108704129A
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 何平有;趙玉龍;劉濤;吳亞婷;焦玉蘭;朱秀同;郁宏偉;呂茂杰;柳珊
• 申請（專利權）人: 瑞普（保定）生物藥業有限公司
• 主分類號: A61K39/225
• 分類號: A61K39/225;A61K39/215;A61K9/19;A61K47/42;A61K47/18;A61K47/32;A61K47/10;A61K47/26;A61K47/02;A61P31/14
• 代理公司: 北京匯信合知識產權代理有限公司 11335
• 代理人: 戴鳳儀

本發明公開了一種豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法。本發明的一種凍干保護劑，包括質量百分比如下組分組成：蔗糖，卡波姆，PEG8000，丙氨酸，L?半胱氨酸，硫酸鋅，酶解明膠，余量為水。本發明的一種豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法，包括如下步驟：(1)病毒儲存液制備；(2)疫苗制備，制得豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯活疫苗。本發明通過添加凍干保護劑，降低了病毒保存和凍干過程中的損傷，提高了產品在保存和使用中的穩定性；本發明不僅實現了儲運過程中冷藏保存，保存期延長到2?8℃保存36個月，可以進行口服免疫，有效減少免疫應激發生。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及一種豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法。

背景技術

豬傳染性胃腸炎(TGE)是由豬傳染性胃腸炎病毒(TEGV)引起的一種多發高度接觸性急性腸道傳染病，以引起2周齡以下仔豬嘔吐、嚴重腹瀉和高死亡率(通常100％)為特征。豬流行性腹瀉(PED)是由豬流行性腹瀉病毒(PEDV)引起的豬的一種高度接觸性腸道傳染病，臨床上以豬的急性腸炎、嘔吐、水樣腹瀉、脫水以及哺乳仔豬的高死亡率為特征。TGE和PED在我國廣泛流行，冬春季節經常在豬群中發生，是豬的常見多發病之一。這兩種病在臨床癥狀、流行病學上極為相似，具有發病急、傳播快、流行廣和各年齡豬只均可感染的特點。

免疫豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗是控制上述兩種傳染病的重要手段。目前疫苗生產和使用中還存在一些問題：一是半成品病毒液保存時間短(-20℃保存期僅2個月)，病毒滴度下降快；二是產品保存條件要求高(需在-20℃保存，保存期18個月)，儲運成本高，由于目前儲運條件限制，疫苗儲運過程中不穩定，病毒滴度下降快，影響免疫效果；三是免疫方式單一，疫苗僅能采用肌肉注射，免疫過程豬只可能產生免疫應激反應，尤其以仔豬為嚴重，免疫效果不理想。因此，亟需開發一種新的豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是克服已有技術之缺陷，提供一種穩定性好、免疫應激小、免疫效果好的豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法。

本發明所述的技術問題是以下述技術方案實現的：本發明的一種凍干保護劑，包括質量百分比如下組分組成：

進一步地，所述的凍干保護劑包括保護劑A和保護劑B，所述的保護劑A是將卡波姆、PEG8000、硫酸鋅溶解于水中，除菌后備用；所述的保護劑B是將蔗糖、丙氨酸、L-半胱氨酸和酶解明膠溶解于水中，除菌后備用。

本發明的一種豬傳染性胃腸炎、豬流行性腹瀉二聯活疫苗的制備方法，包括如下步驟：

(1)病毒儲存液制備：將新收獲的豬傳染性胃腸炎半成品病毒液、豬流行性腹瀉半成品病毒液均按體積比10:1-10:2的比例加入部分保護劑A，充分混勻，制成病毒儲存液，置-20℃以下保存；

(2)疫苗制備：將病毒儲存液室溫放置，至完全融化，然后按兩種半成品病毒液與凍干保護劑體積比1：1加入剩余保護劑A和保護劑B，置37℃下攪拌0.5-1小時，使其充分混勻，定量分裝，冷凍真空干燥，制得豬傳染性胃腸炎、流行性腹瀉二聯活疫苗。

進一步地，在步驟(2)中，所述的凍干保護劑包括質量百分比的如下組分組成：

進一步地，在步驟(2)中，所述的凍干保護劑包括保護劑A和保護劑B，所述的保護劑A由卡波姆、PEG8000、硫酸鋅組成，將卡波姆、PEG8000、硫酸鋅溶解于水中，除菌后備用；所述的保護劑B由蔗糖、丙氨酸、L-半胱氨酸和酶解明膠組成，將蔗糖、丙氨酸、L-半胱氨酸和酶解明膠溶解于水中，除菌后備用。

有益效果：

與現有技術相比，本發明具有如下優點：