[發(fā)明專利]老鸛草提取物及其醫(yī)藥用途

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810694814.8
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108619179A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 楊曉源;黃敏;廖淑珍;謝沈陽;段娟;陳麗;楊陽
• 申請（專利權(quán)）人: 云南白藥中草藥科技有限公司
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P29/00
• 代理公司: 中國國際貿(mào)易促進(jìn)委員會專利商標(biāo)事務(wù)所 11038
• 代理人: 杜仙;劉海羅

本發(fā)明提供老鸛草提取物及其醫(yī)藥用途，具體地，本發(fā)明提供從老鸛草中提取純化得到的四個分級組分以及兩個活性單體，其顯示出較好的抗TNFα活性以及較低的毒性，可用于炎癥尤其是關(guān)節(jié)炎的治療。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明涉及老鸛草提取物及其在制備抑制TNFα的藥物以及抗炎藥物中的用途。

背景技術(shù)

老鸛草(Geranium wilfordii)是牻牛兒苗科老鸛草屬植物，別名：老鸛草《綱目拾遺》、五葉草《滇南本草》、老官草《滇南本草》、五瓣花《滇南本草圖譜》、老貫草《滇南本草圖譜》、天罡草《分類草藥性》。老鸛草的主要化學(xué)成分包括鞣質(zhì)、黃酮類、有機(jī)酸及揮發(fā)油等。迄今，已知老鸛草的藥理作用包括抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肝病、止血及抗腫瘤等功效。

腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor alpha，TNFα)是一種多功能單核細(xì)胞素，其是由巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及天然殺手細(xì)胞所釋出并在急性和慢性發(fā)炎疾病、抗腫瘤反應(yīng)及感染中扮演著關(guān)鍵角色。TNFα促進(jìn)炎癥反應(yīng)，與許多與自身免疫性疾病相關(guān)的臨床問題的發(fā)展有關(guān)，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，強(qiáng)直性脊柱炎，炎性腸病，牛皮癬，銀屑病關(guān)節(jié)炎，化膿性支原體炎和難治性哮喘等。而臨床研究業(yè)已證實TNFα在類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制上扮演著重要角色。

這些都提示了一個抗炎的途徑：抑制TNFα的活性以控制炎癥的發(fā)展，該途徑對患者的生活質(zhì)量有著很好的改善作用。目前已使用TNFα拮抗劑治療與炎癥相關(guān)疾病。然而，TNFα拮抗劑抗炎方法存在毒性大、抗藥性或效果較低的缺點(diǎn)。

在今天“回歸自然”思潮的影響下，天然藥物的開發(fā)成為一股強(qiáng)大的潮流，而中藥又以其豐富的資源、獨(dú)特的療效、較小的毒副作用引起世界的關(guān)注。因此，本領(lǐng)域仍需開發(fā)具有較小毒副作用、抗藥性和/或高效的具有抗炎作用的中藥。

發(fā)明內(nèi)容

在一個方面，本申請?zhí)峁├消X草提取物A，其通過以下方法制備：

(1)將老鸛草在乙醇或乙醇水溶液中提取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集提取液并濃縮，得老鶴草總提取物；

(2)將所述老鶴草總提取物用乙酸乙酯萃取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集乙酸乙酯相并濃縮，將所得濃縮物在吸附樹脂上用水和甲醇混合溶液進(jìn)行梯度洗脫，收集V_水：V_甲醇＝(50:50)-(30:70)時的洗脫液并濃縮，得所述老鶴草提取物A。

本申請中所用術(shù)語“梯度洗脫”是指一種通過不斷改變流動相濃度配比，從而使得樣品中性質(zhì)差異較大的組分實現(xiàn)良好分離的洗脫方法。在洗脫過程中，可通過TLC等手段進(jìn)行跟蹤，以區(qū)分不同組分組成和/或流動相配比下的洗脫液。

在某些優(yōu)選的實施方案中，所述方法具有下述至少一項特征：

1)在步驟(1)中，將每Kg老鸛草在5-12L乙醇或乙醇水溶液中進(jìn)行提取；

2)在步驟(1)中，將老鸛草在30-85wt％乙醇水溶液中提取；

3)在步驟(1)中，將老鸛草在室溫進(jìn)行提取；

4)在步驟(2)中，將所述濃縮物在大孔吸附樹脂上梯度洗脫；

5)在步驟(2)中，將所得濃縮物用V_水：V_甲醇＝(95:5)-(30:70)的混合溶液進(jìn)行梯度洗脫。

在某些優(yōu)選的實施方案中，在步驟(1)中，將老鸛草在30-70wt％乙醇水溶液中提取；例如在30wt％，40wt％，50wt％，60wt％或70wt％的乙醇水溶液中提取。

在某些優(yōu)選的實施方案中，在步驟(2)中，將所述濃縮物在D101型大孔吸附樹脂上進(jìn)行梯度洗脫。