[發明專利]老鸛草提取物及其醫藥用途

在審

• 申請號: 201810694814.8
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN108619179A
• 公開（公告）日: 2018-10-09
• 發明（設計）人: 楊曉源;黃敏;廖淑珍;謝沈陽;段娟;陳麗;楊陽
• 申請（專利權）人: 云南白藥中草藥科技有限公司
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P29/00
• 代理公司: 中國國際貿易促進委員會專利商標事務所 11038
• 代理人: 杜仙;劉海羅

本發明提供老鸛草提取物及其醫藥用途，具體地，本發明提供從老鸛草中提取純化得到的四個分級組分以及兩個活性單體，其顯示出較好的抗TNFα活性以及較低的毒性，可用于炎癥尤其是關節炎的治療。

技術領域

本發明涉及中藥領域，具體地，本發明涉及老鸛草提取物及其在制備抑制TNFα的藥物以及抗炎藥物中的用途。

背景技術

老鸛草(Geranium wilfordii)是牻牛兒苗科老鸛草屬植物，別名：老鸛草《綱目拾遺》、五葉草《滇南本草》、老官草《滇南本草》、五瓣花《滇南本草圖譜》、老貫草《滇南本草圖譜》、天罡草《分類草藥性》。老鸛草的主要化學成分包括鞣質、黃酮類、有機酸及揮發油等。迄今，已知老鸛草的藥理作用包括抗菌、抗病毒、抗氧化、抗肝病、止血及抗腫瘤等功效。

腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor alpha，TNFα)是一種多功能單核細胞素，其是由巨噬細胞、單核細胞及天然殺手細胞所釋出并在急性和慢性發炎疾病、抗腫瘤反應及感染中扮演著關鍵角色。TNFα促進炎癥反應，與許多與自身免疫性疾病相關的臨床問題的發展有關，例如類風濕性關節炎，強直性脊柱炎，炎性腸病，牛皮癬，銀屑病關節炎，化膿性支原體炎和難治性哮喘等。而臨床研究業已證實TNFα在類風濕性關節炎的發病機制上扮演著重要角色。

這些都提示了一個抗炎的途徑：抑制TNFα的活性以控制炎癥的發展，該途徑對患者的生活質量有著很好的改善作用。目前已使用TNFα拮抗劑治療與炎癥相關疾病。然而，TNFα拮抗劑抗炎方法存在毒性大、抗藥性或效果較低的缺點。

在今天“回歸自然”思潮的影響下，天然藥物的開發成為一股強大的潮流，而中藥又以其豐富的資源、獨特的療效、較小的毒副作用引起世界的關注。因此，本領域仍需開發具有較小毒副作用、抗藥性和/或高效的具有抗炎作用的中藥。

發明內容

在一個方面，本申請提供老鸛草提取物A，其通過以下方法制備：

(1)將老鸛草在乙醇或乙醇水溶液中提取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集提取液并濃縮，得老鶴草總提取物；

(2)將所述老鶴草總提取物用乙酸乙酯萃取1-5次(例如1、2、3、4或5次)，收集乙酸乙酯相并濃縮，將所得濃縮物在吸附樹脂上用水和甲醇混合溶液進行梯度洗脫，收集V_水：V_甲醇＝(50:50)-(30:70)時的洗脫液并濃縮，得所述老鶴草提取物A。

本申請中所用術語“梯度洗脫”是指一種通過不斷改變流動相濃度配比，從而使得樣品中性質差異較大的組分實現良好分離的洗脫方法。在洗脫過程中，可通過TLC等手段進行跟蹤，以區分不同組分組成和/或流動相配比下的洗脫液。

在某些優選的實施方案中，所述方法具有下述至少一項特征：

1)在步驟(1)中，將每Kg老鸛草在5-12L乙醇或乙醇水溶液中進行提??；

2)在步驟(1)中，將老鸛草在30-85wt％乙醇水溶液中提取；

3)在步驟(1)中，將老鸛草在室溫進行提?。?/p>

4)在步驟(2)中，將所述濃縮物在大孔吸附樹脂上梯度洗脫；

5)在步驟(2)中，將所得濃縮物用V_水：V_甲醇＝(95:5)-(30:70)的混合溶液進行梯度洗脫。

在某些優選的實施方案中，在步驟(1)中，將老鸛草在30-70wt％乙醇水溶液中提取；例如在30wt％，40wt％，50wt％，60wt％或70wt％的乙醇水溶液中提取。

在某些優選的實施方案中，在步驟(2)中，將所述濃縮物在D101型大孔吸附樹脂上進行梯度洗脫。