[發明專利]一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法

有效

• 申請號: 201810694582.6
• 申請日: 2018-06-29
• 公開（公告）號: CN109280627B
• 公開（公告）日: 2021-02-05
• 發明（設計）人: 王小冬;劉興國;顧兆俊;曾憲磊;魏布;劉翀
• 申請（專利權）人: 中國水產科學研究院漁業機械儀器研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/01
• 代理公司: 上海九澤律師事務所 31337
• 代理人: 周云

1.一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于，它包括以下幾個步驟：

S1、將透光容器放置在玻璃溫室或室外自然光照環境中，白天和黑夜的室溫變化范圍在15～45℃，向透光容器中添加有浮游植物的水體，并向透光容器中添加富含纖維素的草或秸稈，保證草或秸稈漂浮在水體上層；

S2、將混合了鹽類混合物的固體餐飲垃圾添加到草或秸稈上，步驟S1中添加富含纖維素的草或秸稈的量足以讓固體餐飲垃圾不沉入水中，且固體餐飲垃圾恰好淹沒在水中；

S3、培養3～5天，水體綠色變濃甚至變成棕綠色；

培養6～10天，容器內壁上部與草挨著的區域長出綠色附著藻類；

培養11～14天，容器內壁上部深綠色附著藻類面積擴大，并且在出現深綠色附著藻類生長的時候添加三水磷酸氫鎂(MgHPO₄?3H₂O)，添加量為4～15g；

S4、培養15～18天，容器內壁上部綠色附著藻類中出現了暗紅色的附著物，且深綠色的附著藻類逐漸變成暗褐色；

培養19～25天，容器內壁上的暗褐色附著物全面變成暗紅色或血紅色的紅假單胞菌屬光合細菌，而容器內壁上部與草挨著的區域又轉變為深綠色或者繼續保持暗紅色；

S5、步驟S4中附著生長的紅假單胞菌屬光合細菌在不排出容器中水的情況下用布刮取下來；然后在容器中的草或秸稈上繼續添加混合了鹽類的餐飲垃圾，添加的量不超過前一次添加的量，且不用在后續過程中添加三水磷酸氫鎂，從而實現連續地多次培養，直至其中的草或秸稈腐爛了而不能支撐餐飲垃圾在水面的降解；

所述步驟S2中，所述固體餐飲垃圾和水體的添加比例為固體態餐飲垃圾:水體=15～65g:1L，且餐飲垃圾在草或秸稈上的堆積厚度不超過3cm，固體餐飲垃圾被水完全淹沒；

所述步驟S2中，鹽類混合物包括一水磷酸二氫鈣[Ca(H₂PO₄)₂?H₂O]和檸檬酸鐵，其中，所述一水磷酸二氫鈣的質量添加比例為固體餐飲垃圾質量的0.25%～0.75%，檸檬酸鐵的質量添加比例為固體餐飲垃圾質量的0.1‰～0.25‰。

2.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S1在4月下旬～11月上旬的溫暖季節進行。

3.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S2中，所述固體餐飲垃圾是將其中非食物類的物質去除后剩余的食物類垃圾，包括米飯、面食、魚、肉、蛋、蔬菜、水果、骨頭、蛋殼中的幾種或全部，且以米飯、面食淀粉類物質為主，確保餐飲垃圾中液態水盡量少，并攤開風干1小時后備用。

4.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S1中，所述透光容器材質為普通無色透明玻璃或白色透光塑料或無色透明塑料。

5.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S1中，所述草或者秸稈是指稻草或綠化草坪用草或小麥秸稈，在堆積一定厚度后其能保持固態的餐飲垃圾在水面而不沉入水底。

6.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S4中，附著生長的紅假單胞菌屬光合細菌的最大厚度能達到1～2mm，培養期間隨時補充自來水，補充蒸發耗水。

7.如權利要求1所述的一種快速且連續培養附著態生長的紅假單胞菌屬光合細菌的方法，其特征在于：所述步驟S1中，初始添加的含浮游植物的淡水水體中總氮濃度在2～30mg/L，葉綠素a濃度在30～2700μg/L。