[發明專利]用于免疫檢測的微球的制備方法在審
| 申請號: | 201810694550.6 | 申請日: | 2018-06-29 |
| 公開(公告)號: | CN108828209A | 公開(公告)日: | 2018-11-16 |
| 發明(設計)人: | 耿英利;馬春霞;甘萍萍;吳昌英;龍騰鑲 | 申請(專利權)人: | 邁克生物股份有限公司 |
| 主分類號: | G01N33/531 | 分類號: | G01N33/531 |
| 代理公司: | 北京派特恩知識產權代理有限公司 11270 | 代理人: | 陳萬青;張穎玲 |
| 地址: | 611731 四*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 微球 制備 免疫檢測 標記物 緩沖液 混合溶液 羧基微球 封閉劑 交聯劑 試劑盒 孵育 稀釋 封閉 | ||
1.一種標記微球的方法,所述方法包括以下步驟:
1)使用緩沖液稀釋所述微球和待標記物;
2)得到所述微球與待標記物的混合溶液;
3)加入交聯劑進行孵育;
4)加入封閉劑封閉;
其中,所述微球為羧基微球;步驟1)中的緩沖液的pH為6.3~9.5。
2.根據權利要求1所述的方法,其中,步驟1)中的緩沖液的pH為7.0~9.0。
3.根據權利要求1所述的方法,其中,步驟1)中的緩沖液是離子強度為3~30mM的Good’s緩沖液,或者是離子強度為10~500mM的氨基酸類緩沖液。
4.根據權利要求3所述的方法,其中,所述Good’s緩沖液為選自HEPES、MOPS、MES、TES、TAPS和HEPPSO中的一種或更多種。
5.根據權利要求3所述的方法,所述Good’s緩沖液的離子強度為5mmol/L~25mmol/L。
6.根據權利要求3所述的方法,其中,所述氨基酸類緩沖液為中性脂肪族氨基酸緩沖液和/或堿性氨基酸緩沖液。
7.根據權利要求6所述的方法,其中,所述中性脂肪族氨基酸緩沖液為甘氨酸緩沖液和/或丙氨酸緩沖液。
8.根據權利要求6所述的方法,其中,所述堿性氨基酸緩沖液為精氨酸緩沖液和/或賴氨酸緩沖液。
9.根據權利要求3所述的方法,其中,所述氨基酸類緩沖液的離子強度為15mmol/L~300mmol/L。
10.根據權利要求1~9中任一項所述的方法,其中,所述交聯劑與微球的重量比為0.5%~4.0%,優選為1.0%~3.5%。
11.根據權利要求1~9所述的方法,其中,所述待標記物為含氨基的待標記物。
12.根據權利要求11所述的方法,其中,所述含氨基的待標記物為選自蛋白質、肽和多肽中的一種或更多種。
13.根據權利要求11所述的方法,所述含氨基的待標記物為抗原和/或抗體。
14.根據權利要求13所述的方法,所述抗體為單克隆抗體和/或多克隆抗體。
15.根據權利要求1~9所述的方法,所述方法還包括:
5)加入保護劑、防腐劑和表面活性劑中的一種或更多種。
16.根據權利要求1~9所述的方法,其中,所述交聯劑為EDC、DCC或DIC,優選為EDC。
17.根據權利要求1~9所述的方法,其中,所述方法不包括純化步驟。
18.根據權利要求17所述的方法,其中,所述純化步驟采用超濾和/或離心來進行。
19.根據權利要求1~9所述的方法,其中,所述方法不包括分散微球的步驟。
20.根據權利要求19所述的方法,其中,所述分散微球的步驟采用超聲或振蕩來進行。
21.由權利要求1~20中任一項的方法制備得到的經標記的微球溶液。
22.一種試劑盒,所述試劑盒包括權利要求21所述的經標記的微球溶液。
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