[發(fā)明專(zhuān)利]一種β淀粉樣肽1-42的固相合成法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810694251.2
• 申請(qǐng)日: 2018-06-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108676082A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-10-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐紅巖;竺劍峰
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 濱海吉爾多肽有限公司;上海吉爾多肽有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07K14/47
• 分類(lèi)號(hào): C07K14/47;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 上海浦東良風(fēng)專(zhuān)利代理有限責(zé)任公司 31113
• 代理人: 張勁風(fēng)

本發(fā)明提供了一種β淀粉樣肽1?42的固相合成法，主要解決現(xiàn)有合成方法存在的工藝復(fù)雜、成本高、收率低等技術(shù)問(wèn)題。本發(fā)明合成法具體包括如下步驟：（1）固相合成Fmoc?Ala?HMP?TentaGel樹(shù)脂；（2）根據(jù)β淀粉樣肽1?42的肽序在所述的Fmoc?Ala?HMP?TentaGel樹(shù)脂上偶聯(lián)氨基酸或Hmb（Dmb）氨基酸得到β淀粉樣肽1?42樹(shù)脂肽；（3）所述的β淀粉樣肽1?42多肽樹(shù)脂經(jīng)裂解得到β淀粉樣肽1?42粗品。本發(fā)明采用的制備β淀粉樣肽1?42的工藝方法具有操作簡(jiǎn)便、粗肽純度高、綜合收率高的特點(diǎn)，具有可觀的經(jīng)濟(jì)實(shí)用價(jià)值和廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及多肽固相合成領(lǐng)域，尤其涉及β淀粉樣肽1-42的固相合成法。

背景技術(shù)

β淀粉樣肽1-42，英文名稱(chēng)為 β-Amyloid(1-42)，分子 式 :C₂₀₃H₃₁₁N₅₅O₆₀S₁，分子量： 4514.10，其肽序?yàn)?：NH₂-Asp-Ala-Glu-Phe-Arg-His-Asp-Ser-Gly-Tyr-Glu-Val-His-His-Gln-Lys-Leu-Val-Phe-Phe-Ala-Glu-Asp-Val-Gly-Ser-Asn-Lys-Gly-Ala-Ile-Ile-Gly-Leu-Met-Val- Gly- Gly-Val-Val-Ile-Ala-COOH。

阿爾茨海默病（Alzheimers disease，AD）是一種發(fā)病率高、危害極大的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性疾病，主要臨床癥狀是智力進(jìn)行性減退，特征性病理學(xué)改變是老年斑，神經(jīng)元纖維纏結(jié)，以海馬、皮層區(qū)域?yàn)橹鞯纳窠?jīng)元數(shù)目減少。常發(fā)于老年人群，隨著目前國(guó)家人口老齡化的日益嚴(yán)重，開(kāi)展AD的研究具有重大的社會(huì)效益。

β淀粉樣肽1-42（簡(jiǎn)稱(chēng)Aβ）是存在于阿爾茨海默病患者腦組織中的特異性病理改變之物，同時(shí)它在AD患者的腦積液及血漿中有所改變。近年來(lái)，抑制Aβ的聚集及降低其毒性已成為AD治療的重要策略。Aβ抗體與Aβ42肽、tau蛋白等聯(lián)合檢測(cè)可用于AD的早期輔助診斷。

目前β淀粉樣肽1-42的常規(guī)制備方法有生物法和化學(xué)法兩種，生物法是通過(guò)基因蛋白表達(dá)來(lái)制備，CN200810025285公開(kāi)了一種制備β淀粉樣肽1-42的方法，生物法由于其工藝復(fù)雜，可變因素多，成本昂貴，不利于后期產(chǎn)業(yè)化。而常規(guī)的化學(xué)合成法由于其序列第29-42位氨基酸的極度疏水性，容易形成β折疊構(gòu)象，會(huì)導(dǎo)致氨基被包裹在折疊肽序中不易暴露出來(lái)，加大了后續(xù)氨基酸的偶聯(lián)難度，同時(shí)也降低了茚三酮檢測(cè)的靈敏性，容易造成假陰性的現(xiàn)象。導(dǎo)致偶聯(lián)不完全，缺省肽雜質(zhì)的產(chǎn)生，后續(xù)純化難度增加，收率降低。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種高收率、低成本、反應(yīng)條件溫和、環(huán)境污染小、有利于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化的β淀粉樣肽1-42的固相合成法，解決現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷。

一種β淀粉樣肽1-42的固相合成法，包括如下步驟：

（1）固相合成Fmoc-Ala-HMP-TentaGel 樹(shù)脂；