[發明專利]一種定向誘導提高養心菜植株耐鹽性的方法

在審

• 申請號: 201810688745.X
• 申請日: 2018-06-28
• 公開（公告）號: CN108782250A
• 公開（公告）日: 2018-11-13
• 發明（設計）人: 張國新;王秀萍;姚玉濤;劉雅輝;王碩
• 申請（專利權）人: 河北省農林科學院濱海農業研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 南京業騰知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 32321
• 代理人: 鄭婷

本發明涉及一種定向誘導提高養心菜植株耐鹽性的方法，選取健壯養心菜成年植株，將中間部位沖洗干凈后，莖、葉分離，莖切5?8cm段，對莖段進行預消毒后，用蒸餾水沖洗干凈，再用0.1％的升汞溶液滅菌，最后用蒸餾水沖洗干凈，得到無菌的莖段，將無菌的莖段先切成1cm的莖段，再縱切，得到半圓柱形莖段，將半圓柱形莖段接種于誘導培養基中，12?15d后獲得莖段愈傷組織，然后通過鹽分遞增的鹽基多代培養，不斷誘導提高養心菜植株的耐鹽性。該方法操作簡單，效率高，能顯著提高養心菜植株的耐鹽性，獲得的耐鹽植株，耐鹽性可提高30％，生根苗在含鹽量7g/kg土壤正常生長，成苗在含鹽量10g/kg土壤能正常生長。

技術領域

本發明涉及一種定向誘導提高養心菜植株耐鹽性的方法，耐鹽植物育種領域。

背景技術

我國有鹽堿地面積1億畝，土壤鹽漬化是制約農業生產的主要因素之一。目前，改良鹽堿地的主要措施有物理措施、工程措施及生物措施，其中，生物措施，尤其是耐鹽植物的利用是鹽堿地改良的最經濟、有效的改良途徑。耐鹽植物種質資源篩選、創新是鹽堿地改良利用的核心關鍵。由于植物耐鹽性受多基因控制，耐鹽機理復雜，有性雜交等常規育種方法在耐鹽品種選育及資源創新上不能很好體現。

養心菜，學名費菜，景天科三七屬多年生宿根植物，其功能性突出，可食用，具有保健作用，尤其在園林綠化上得到了很好應用。研究發現，在低于7g/kg的土壤鹽分脅迫下，養心菜植株生長良好，但高于7g/kg土壤鹽分對植株抑制極顯著，而我國鹽堿地的土壤鹽分通常高于7g/kg。目前對養心菜的研究主要集中在繁育及栽培技術、營養及藥用價值等方面，并沒有提高耐鹽性方面的研究。因此，提高養心菜植株的耐鹽性，為鹽堿灘涂生態修復及鹽堿地生物改良提供優質耐鹽資源很有必要。

發明內容

本發明目的是解決現有技術的上述，提供一種定向誘導提高養心菜植株耐鹽性的方法，該方法操作簡單，效率高，能顯著提高養心菜植株的耐鹽性。

技術方案

一種定向誘導提高養心菜植株耐鹽性的方法，包括如下步驟：

(1)選取健壯養心菜成年植株，將中間部位沖洗干凈后，莖、葉分離，莖切5-8cm段備用，對莖段進行預消毒后，用滅菌后的蒸餾水沖洗干凈，再用0.1％的升汞溶液滅菌10-15min，最后用滅菌后的蒸餾水沖洗干凈，得到無菌的莖段；

(2)將步驟(1)中得到的無菌的莖段先切成1cm的莖段，再縱切，得到半圓柱形莖段，將半圓柱形莖段接種于誘導培養基中，12-15d后獲得莖段愈傷組織；

(3)將步驟(2)的莖段愈傷組織接種到含有110mmol/L NaCl的繼代培養基中，培養15-20d，然后選取淡黃色愈傷組織移入含有130mmol/L的NaCl的MS培養基中，進行第二代鹽基培養；15-20d后，選取淡黃色愈傷組織移入170mmol/L NaCl的MS培養基中，進行第三代鹽基培養；15-20d后，選淡黃色良愈傷組織移入190mmol/L的NaCl的MS培養基中，進行第四代鹽基培養，培養15-20d，然后選擇長勢良好的組織移入210mmol/L的NaCl的MS培養基中，進行第五代鹽基培養，培養15-20d后，獲得耐鹽愈傷組織；

(4)將步驟(3)的耐鹽愈傷組織移入分化培養基中，繼續培養15-20d后，選取生長健壯的小苗移入生根培養基中，10-15d完成生根，獲得耐鹽試管苗，繼續培養28-32d，閉瓶煉苗10-15d，然后移植至體積比為2:1的草炭和蛭石形成的基質中，30d后移栽至大棚土壤中。

步驟(1)中，所述預消毒是指：將莖段浸泡在體積濃度為65-75％的乙醇溶液中。

步驟(1)中，所述用0.1％的升汞溶液滅菌的時間為14min，研究發現此時滅菌最完全且發芽率最高。