[發(fā)明專利]一種提高L-異亮氨酸產(chǎn)量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810687513.2
• 申請日: 2018-06-28
• 公開（公告）號: CN108796003B
• 公開（公告）日: 2021-03-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 寧健飛;陳曉雙;蔡立明
• 申請（專利權(quán)）人: 無錫晶海氨基酸股份有限公司
• 主分類號: C12P13/06
• 分類號: C12P13/06;C12R1/15
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發(fā)明公開了一種提高L?異亮氨酸產(chǎn)量的方法，屬于微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明以以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)作為生產(chǎn)菌株，在以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)的發(fā)酵培養(yǎng)基中添加脂肪酸和/或氯高鐵血紅素以提高其產(chǎn)酸水平，成功將以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)產(chǎn)L?異亮氨酸的產(chǎn)量從15g/L提高到了19g/L。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種提高L-異亮氨酸產(chǎn)量的方法，屬于微生物發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

L-異亮氨酸是人體必需的八種氨基酸之一，同時又是三種支鏈氨基酸之一，是合成人體激素、酶類的原料，具有促進蛋白質(zhì)合成和抑制其分解的效果，在人體生命活動中起著重要作用，現(xiàn)已被廣泛運于生物醫(yī)藥、組織工程、光化學(xué)、電化學(xué)、食品工業(yè)、化妝品等領(lǐng)域。在國外，L-異亮氨酸還被其大量用于乳牛催乳、制備飼料添加劑以及生產(chǎn)功能飲料。

目前，常用微生物發(fā)酵法生產(chǎn)L-異亮氨酸。而現(xiàn)有的L-異亮氨酸生產(chǎn)菌主要有谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌、大腸桿菌、乳糖發(fā)酵短桿菌、以鈍齒棒桿菌以及粘滯賽氏桿菌，其中，除谷氨酸棒桿菌、黃色短桿菌外，其余均的產(chǎn)酸能力均十分低下，只有谷氨酸棒桿菌與黃色短桿菌的三分之一到二分之一。

為提高乳糖發(fā)酵短桿菌、以鈍齒棒桿菌以及粘滯賽氏桿菌等的產(chǎn)酸水平，已經(jīng)有許多學(xué)者從菌株的角度，試圖通過突變菌株、構(gòu)建基因工程菌得到產(chǎn)酸水平提高的乳糖發(fā)酵短桿菌、以鈍齒棒桿菌以及粘滯賽氏桿菌等。

但是，由于突變菌株的正向突變率極低、基因工程菌的構(gòu)建也具有不確定性，因此，急需找到新的提高乳糖發(fā)酵短桿菌、以鈍齒棒桿菌以及粘滯賽氏桿菌等菌產(chǎn)酸水平的思路。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種提高L-異亮氨酸產(chǎn)量的方法。此方法以以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)作為生產(chǎn)菌株，在以鈍齒棒桿菌(Corynebacteriumcrenatum)的發(fā)酵培養(yǎng)基中添加脂肪酸和/或氯高鐵血紅素以提高其產(chǎn)酸水平，成功將以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)產(chǎn)L-異亮氨酸的產(chǎn)量從15g/L提高到了19g/L。

本發(fā)明的技術(shù)方案如下：

本發(fā)明提供了一種提高L-異亮氨酸產(chǎn)量的方法，所述方法為將L-異亮氨酸生產(chǎn)菌株先接種于種子培養(yǎng)基中進行擴培，得到種子液，再將種子液接種于發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵，得到發(fā)酵液；所述發(fā)酵培養(yǎng)基中添加有脂肪酸和/或氯高鐵血紅素。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述脂肪酸的添加量為3～5wt％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述脂肪酸的添加量為3wt％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述脂肪酸包含亞麻酸、亞油酸、油酸。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述氯高鐵血紅素的添加量為2～3wt％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述氯高鐵血紅素的添加量為2wt％。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述L-異亮氨酸生產(chǎn)菌株為以鈍齒棒桿菌(Corynebacterium crenatum)。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述種子培養(yǎng)基的成分包含葡萄糖90～100g/L、硫酸銨12～20g/L、玉米漿90～100g/L、磷酸二氫鉀3～4g/L以及硫酸鎂1～2g/L。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述種子培養(yǎng)基的成分包含葡萄糖96g/L、硫酸銨16g/L、玉米漿96g/L、磷酸二氫鉀3.2g/L以及硫酸鎂1.6g/L。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述種子培養(yǎng)基的pH為6～7。

在本發(fā)明的一種實施方式中，所述種子培養(yǎng)基的pH為6.8。