[發明專利]與克羅恩病相關的miRNA標志物及其應用

有效

• 申請號: 201810686991.1
• 申請日: 2018-06-28
• 公開（公告）號: CN108796066B
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發明（設計）人: 石巖;姚俊;許亞平;周勇;王濤
• 申請（專利權）人: 鎮江市第一人民醫院
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/686;C12N15/11
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 黃欣

本發明公開了一組與克羅恩病相關的miRNA標志物及其應用。該標志物為miR?219a?1?3p和/或miR?219a?5p，采用qRT?PCR對miR?219a?1?3p和/或miR?219a?5p在克羅恩病中的表達水平進行檢測，對克羅恩病的臨床診斷和靶向治療提供參考價值。該標志物用于克羅恩病臨床診斷的準確性、靈敏度及特異度均較高，具有方便、快捷的優點，同時在一定程度上避免了腸鏡檢查的局限性。

技術領域

本發明屬于醫學分子生物學技術領域，具體涉及一組與克羅恩病相關的miRNA標志物及其應用。

背景技術

克羅恩病(Crohn’s disease,CD)是一種累及胃腸道的慢性、復發性、非特異性炎癥性疾病。目前CD的病因和發病機制仍不清楚，但是越來越多的研究表明，CD4⁺T細胞過度激活介導的炎癥免疫反應在CD發病過程中具有至關重要作用。近年來，CD在我國的發病率呈逐年上升趨勢，該疾病常遷延不愈，病情易復發，有致殘、癌變等風險，嚴重影響了患者生存質量，給社會造成了沉重的醫療經濟負擔。因此，闡明CD的具體發病機制，找到能夠用于CD臨床診斷標志物和治療的新靶點，對我國CD臨床防治研究具有重要意義。

目前用于CD臨床診斷的重要檢查方法主要為內鏡檢查和組織病理學檢查，創傷性較大。許多患者因病變導致腸腔嚴重狹窄，出現難以耐受腸鏡檢查或腸鏡檢查范圍受限制等情況，且臨床上目前仍缺乏與CD及其疾病活動性明顯相關的特異性指標，使得CD臨床診斷面臨許多困難。由于缺乏特異性診斷標志物，部分CD常常難以與腸結核、缺血性腸炎和腸道腫瘤等疾病相鑒別，其治療亦面臨巨大挑戰。因此，尋找CD的診斷標志物對臨床上的診療過程來說是極其重要的，且對于CD的靶向治療也具有積極意義。

microRNA(miRNA)是一類由18-24個核苷酸組成的內源性非編碼單鏈小分子RNA，具有高度的保守性、表達多樣性等特點。miRNA通過其5’端2-7個核苷酸(種子區)與靶基因mRNA的3’-UTR完全或不完全互補配對，導致靶基因轉錄抑制或降解，廣泛參與細胞分化、成熟、增殖、凋亡、代謝等生物學過程。目前研究已發現多種miRNA在CD患者CD4⁺T細胞中表達異常，這些miRNA表達水平的改變與CD炎癥反應嚴重程度密切相關，表明miRNA在CD診斷與治療新型方法的開發應用上具有廣闊的前景。

依據3’端和5’端序列不同，miR-219a-1可分別編碼產生成熟的miR-219a-1-3p和miR-219a-5p分子。此外，miR-219a-2亦可編碼產生成熟的miR-219a-5p分子。研究證實，miR-219a-1-3p和miR-219a-5p在多種慢性炎癥、自身免疫性疾病、腫瘤(結腸癌、胰腺癌、乳腺癌、前列腺癌、肺癌、惡性膠質瘤)等人體病理生理過程中發揮重要作用。但是，miR-219a-1-3p和miR-219a-5p在CD患者CD4⁺T細胞中的表達水平及作用均未有報道。

發明內容

解決的技術問題：本發明的目的是提供一組與克羅恩病相關的miRNA標志物及其應用，該miRNA標志物對于克羅恩病診斷具有很高的靈敏度和特異性，可以作為新型的生物標志物用于克羅恩病的檢測，為克羅恩病臨床診斷提供參考依據。

技術方案：與克羅恩病相關的miRNA標志物，該標志物為miR-219a-1-3p和/或miR-219a-5p，miR-219a-1-3p的RNA序列如SEQ ID NO.1所示，miR-219a-5p的RNA序列如SEQ IDNO.2所示。

上述與克羅恩病相關的miRNA標志物在制備檢測克羅恩病診斷試劑盒中的應用。

上述與克羅恩病相關的miRNA標志物在篩選或制備治療克羅恩病靶向藥物中的應用。