[發明專利]一類保羅霉素衍生物及其制備方法與應用

有效

• 申請號: 201810677960.X
• 申請日: 2018-06-27
• 公開（公告）號: CN108623644B
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 陳義華;唐越;王敏
• 申請（專利權）人: 中國科學院微生物研究所
• 主分類號: C07H17/04
• 分類號: C07H17/04;C07H1/00;A61K31/7048;A61P31/04;C12P19/60;C12R1/465
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;趙靜

1.結構式如式I所示的化合物或其藥學上可接受的鹽、酯：

所述式I所示的化合物具體為palsimycin A、palsimycin B、palsimycin C或palsimycin D，其結構式如下所示：

2.權利要求1所述化合物的制備方法，包括下述步驟：

1)將Streptomyces paulus NRRL8115菌株在含N-乙酰半胱胺的液體培養基中進行發酵培養，收集發酵液；

2)將所述發酵液離心，收集上清液，將所述上清液用乙酸乙酯進行萃取，收集乙酸乙酯相進行干燥后濃縮，得粗提物；將所述粗提物用硅膠柱色譜進行分離純化，其中所述硅膠柱色譜的洗脫液依次為：1倍柱體積的石油醚、1～1.5倍柱體積的石油醚和乙酸乙酯體積比1:1混合液、1～1.5倍柱體積的乙酸乙酯、1.5～2倍柱體積的乙酸乙酯和甲醇體積比1:1混合液、1倍柱體積的甲醇，收集用乙酸乙酯和甲醇體積比1:1混合液洗脫的洗脫組分并濃縮，得濃縮物；

將所述濃縮物通過C18反相填料柱色譜進行分離，其洗脫相依次為：水、1倍柱體積的體積分數為10％的乙腈-水溶液、1.5～2倍柱體積的體積分數為30％的乙腈-水溶液、1～1.5倍柱體積的體積分數為50％乙腈-水溶液，收集用體積分數為50％乙腈-水溶液洗脫的洗脫組分，除去有機相、干燥，得粗分離制品；

3)將所述粗分離制品以乙腈為溶劑，配制成溶液；然后利用反相高效液相色譜進行分離，以乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水為流動相，所述乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水按照體積比4:6進行等濃度梯度洗脫，依次收集保留時間為12.5～13.0min洗脫組分記為組分1，收集保留時間13.4～14.0min的洗脫組分記為組分2，收集保留時間17.2～17.9min的洗脫組分記為組分3，收集保留時間18.2～19.3min的洗脫組分記為組分4，收集保留時間21.0～21.8min的洗脫組分記為組分5，收集保留時間19.4～19.8min的洗脫組分記為組分6，收集保留時間20.2～20.8min的洗脫組分記為組分7，收集保留時間24.0～26.0min的洗脫組分記為組分8；

4)將所述組分3、組分4合并，利用反相高效液相色譜進行二次精制，以乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水為流動相，以所述乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水按照體積比43:57進行等濃度梯度洗脫，收集保留時間為12.0～13.0min的洗脫液；經濃縮、干燥得到所述palsimycin A；

將所述組分1、組分2合并，利用反相高效液相色譜進行二次精制，以乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水為流動相，以所述乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水按照如下時間程序中乙腈百分比進行梯度洗脫：0～3min,35％；3～8min,35％～40％；8～13min,40％～43％；13～20min,43％～50％；20～22min,50％～100％；22～24min,100％；24～26min,100％～50％；26～30min,50％～35％。收集保留時間為18.0～19.0min時的洗脫液；經濃縮、干燥得到所述palsimycin B；

將所述組分6、組分7合并，利用反相高效液相色譜進行二次精制，以乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水為流動相，以所述乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水按照體積比46:54進行等濃度梯度洗脫，收集保留時間為11.5～13.0min時的洗脫液；經濃縮、干燥得到所述palsimycin C；

將所述組分5利用反相高效液相色譜進行二次精制，以乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水為流動相，以所述乙腈、含質量分數0.06％乙酸的水按照體積比57:43進行等濃度梯度洗脫，收集保留時間為7.3～7.9min時的洗脫液；經濃縮、干燥得到所述palsimycin D。

3.根據權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述步驟1)中，所述含N-乙酰半胱胺的液體培養基中N-乙酰半胱胺的體積分數為0.1％～0.2％；

所述發酵培養的條件為：在28℃培養36～48h；

所述Streptomyces paulus NRRL8115的接種量為2％～4％。