[發明專利]一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法及應用

有效

• 申請號: 201810674622.0
• 申請日: 2018-06-27
• 公開（公告）號: CN109078614B
• 公開（公告）日: 2021-04-20
• 發明（設計）人: 夏可旭;潘建明;朱恒佳;劉金鑫
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: B01J20/24
• 分類號: B01J20/24;B01J20/30;C07K14/77;C07K1/14
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1.一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)制備SiO₂，并分散于無水乙醇中，得SiO₂分散液，備用；

(2)氨基修飾的SiO₂納米粒子SiO₂-NH₂的制備：

在3-氨基丙基三乙氧基硅烷APTES中，加入步驟(1)中得到的SiO₂分散液與無水乙醇，超聲分散均勻，置于水浴中反應，反應結束后，將產物用無水乙醇洗滌多次后，得到SiO₂-NH₂納米粒子，備用；

(3)醛基修飾的SiO₂納米粒子SiO₂-CHO的制備：

將步驟(2)中制得的SiO₂-NH₂納米粒子溶于甲醇，而后加入戊二醛溶液，超聲分散后用錫紙包裹避光反應，反應結束后將產物離心分離并用無水乙醇與雙蒸水清洗多次，真空干燥至恒重，得到SiO₂-CHO納米粒子；

(4)多乙烯多胺枝接的SiO₂的制備：

稱取一定量多乙烯多胺和SiO₂-CHO納米粒子溶于甲醇，超聲分散均勻，室溫反應8-24h，每4小時加入一定量的硼氫化鈉，反應結束后，將產物離心分離，并用無水乙醇與雙蒸水分別洗滌3次，最后在真空干燥，得到SiO₂-多乙烯多胺；

(5)4-甲酰基苯硼酸修飾的納米粒子SiO₂-FPBA的制備：

將步驟(4)制得的SiO₂-多乙烯多胺與一定量4-甲酰基苯硼酸分散溶解于甲醇中，室溫下磁力攪拌反應8-24h，每4小時加入一定量的硼氫化鈉，反應結束后，將產物離心分離，并用無水乙醇與雙蒸水分別洗滌3次，最后真空干燥，得到產物SiO₂-4-甲酰基苯硼酸；

(6)枝狀苯硼酸修飾表面印跡聚合物(SiO₂-MIPs)的制備

稱取步驟(5)制得的SiO₂-4-甲酰基苯硼酸納米粒子，分散于PBS緩沖溶液中，隨后加入一定量的模板蛋白卵清白蛋白OVA，靜置，使OVA通過硼親和作用吸附于粒子表面，而后將粒子離心分離并用PBS緩沖溶液洗滌多次除去表面非特異性吸附的OVA，將粒子再次分散于一定量的雙蒸水中，并加入一定量的鹽酸多巴胺DA，攪拌溶解后緩慢滴入Tris-HCl緩沖溶液，室溫反應2-10h，將產物離心分離并用無水乙醇與去離子水分別洗滌三次，隨后用含有SDS的醋酸溶液洗滌產物多次直到在UV-vis光譜檢測不到OVA的吸收峰，以除去模板分子OVA，用去離子水洗至中性，真空干燥，得到最終產物SiO₂-MIPs。

2.如權利要求1所述的一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，3-氨基丙基三乙氧基硅烷APTES和SiO₂分散液體積比例為1-3：10，SiO₂分散液的濃度0.22g/mL。

3.如權利要求1所述的一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，水浴中反應的溫度為45-55℃，時間為12h。

4.如權利要求1所述的一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，SiO₂-NH₂納米粒子、甲醇和戊二醛溶液的比例為2.2g：10-50mL：2-6mL，其中，戊二醛溶液的體積百分濃度為25％。

5.如權利要求1所述的一種基于枝狀硼酸的糖蛋白分子表面印跡聚合物的制備方法，其特征在于，步驟(3)中，避光反應的溫度為15-35℃，時間為8-24h，真空干燥的溫度為25℃。