[發(fā)明專利]一種黃精、桑葉和玉竹配伍藥物組合物質(zhì)量檢測方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810671920.4
• 申請日: 2018-06-26
• 公開（公告）號(hào): CN108562685B
• 公開（公告）日: 2020-05-12
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 彭騰;韓笑;張瑤;匡于;趙永艷;向本超;何沛煜;張軍銀
• 申請（專利權(quán)）人: 成都中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/90
• 分類號(hào): G01N30/90;G01N21/78
• 代理公司: 四川力久律師事務(wù)所 51221
• 代理人: 陳明龍;劉雪蓮

1.一種黃精、桑葉和玉竹配伍藥物組合物質(zhì)量檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）薄層色譜鑒別：對黃精、桑葉和玉竹分別進(jìn)行薄層色譜鑒別，

所述桑葉的薄層鑒別方法如下：

（101A）桑葉供試品溶液制備：精密稱量桑葉，加入石油醚，水浴鍋回流加熱，抽濾，將藥渣揮干；然后加入乙醇超聲提取，濾過，保留濾液，將濾液蒸發(fā)干，得殘?jiān)?，加水加熱溶解，濾過，濾液蒸干；最后加入了甲醇將殘?jiān)芙?，得到桑葉供試品溶液；

（101B）黃精、桑葉和玉竹供試品溶液：稱取黃精、桑葉和玉竹組合物，用石油醚加熱回流提取，棄去石油醚液，揮干藥渣；藥渣加入乙醇超聲提取，過濾，保留濾液，蒸干濾液得殘?jiān)患铀芙鈿堅(jiān)?，再濾過，蒸干濾液，最后加甲醇使殘?jiān)芙?，完成黃精、桑葉和玉竹配伍的供試品溶液的制備；

（101C）陰性供試品溶液的制備：精密稱取黃精和玉竹，按照101B步驟制備得到陰性供試品溶液；

（101D）對照藥材的制備：取桑葉對照藥材，按照101B步驟制備得到對照藥材溶液；

（105E）TLC色譜鑒別：采用硅膠板，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸作為展開劑，進(jìn)行展開，展開完成后晾干，噴以3-6wt.%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點(diǎn)呈色清晰，最后置于紫外光燈下檢視；

其中，甲苯-乙酸乙酯-甲酸的體積比為5:2:1；

所述黃精的薄層鑒別方法如下：

（102A）黃精供試溶液制備：稱取黃精，打粉，加入乙醇，回流提取，過濾，將濾液蒸干，加水溶解殘?jiān)?，用正丁醇振搖提取，蒸發(fā)干燥，加入甲醇使殘?jiān)芙猓瓿晒┰嚻啡芤旱闹苽洌?/p>

（102B）黃精、桑葉和玉竹供試品溶液：稱取黃精、桑葉和玉竹組合物，用石油醚加熱回流提取，棄去石油醚液，揮干藥渣；藥渣加入乙醇超聲提取，過濾，保留濾液，蒸干濾液得殘?jiān)患铀芙鈿堅(jiān)贋V過，蒸干濾液，最后加甲醇使殘?jiān)芙?，完成黃精、桑葉和玉竹配伍的供試品溶液的制備；

（102C）陰性供試品溶液制備：精密稱取桑葉和玉竹，按照步驟102B方法制備陰性供試品溶液；

（102D）對照藥材的制備：精密稱取黃精對照藥材，按照步驟102B方法制備對照藥材溶液；

（102E）TLC色譜鑒別：采用重量比例為硅膠：0.7CMC-Na=1：3的原料制成硅膠板，用石油醚-乙酸乙酯-甲酸=4.8-5.2：1.9-2.1：0.1的混合溶液作為展開劑進(jìn)行展開；展開完成后，噴3-6%香草醛硫酸溶液顯色，在101-107℃加熱至斑點(diǎn)呈色清晰，最后置于紫外光燈下檢視；

（2）多糖含量測定：

所述多糖含量測定方法為：

（201）對照品溶液的制備：取葡萄糖對照品，干燥至恒重，精密稱取，加水，超聲溶解，搖勻，配制得到葡萄糖對照品溶液；

（202）供試品溶液的制備：取清蒸黃精，干燥至恒重，精密稱取，加入乙醇，水浴鍋加熱回流提取，趁熱濾過，并用乙醇洗滌殘?jiān)?~3次，合并乙醇提取液和乙醇洗滌液得到第一提取液；將殘?jiān)盀V紙放于燒瓶中，加水，置沸水浴鍋中加熱回流，趁熱濾過，用水洗滌殘?jiān)盁?~4次，合并水提取濾液與水洗液，得到第二提取液；將第一提取液和第二提取液合并，搖勻，定容，得到供試品；

（203）苯酚溶液的配制：稱取苯酚，精密量取蒸餾水溶解苯酚，得苯酚溶液，避光密封保存于冰箱中；

（204）顯色及測定：分別精密量取葡萄糖對照品溶液和供試品溶液置于試管中，調(diào)整濃度，搖勻；將試管放于冷水中，精密量取苯酚溶液，混合均勻，并迅速加入硫酸，振搖均勻，放置于35-45℃水浴20-40min，取出，冰水浴冷卻，備用；以相應(yīng)的試劑為空白對照，于紫外分光光度計(jì)上掃描光譜圖；

（205）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：精密量取對照品溶液配制成梯度濃度對照品溶液，按照步驟204中相同的苯酚-硫酸法顯色，然后用紫外-可見分光光度法測定波長480-490nm處吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

（206）結(jié)合步驟204的測試結(jié)果和步驟205繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算確定供試品中的多糖含量；

（3）5-羥甲基糠醛含量測定：采用HPLC檢測組合物中5-羥甲基糠醛含量；

（4）其他測試：水分含量測試、灰分含量測試和浸出物含量測試。

2.如權(quán)利要求1所述質(zhì)量檢測方法，其特征在于，步驟101A，精密稱量桑葉2g，隨后加入石油醚30mL，水浴鍋上回流加熱30分鐘，抽濾之后棄去石油醚液；藥渣揮干，加入乙醇30mL，超聲20分鐘，濾過，保留濾液，將濾液蒸發(fā)干，留下的殘?jiān)訜崴?0mL，在60℃水浴上邊溶解邊攪拌，濾過，濾液蒸干，最后加入了甲醇1mL將殘?jiān)芙?，完成了桑葉供試品溶液的制備。