[發明專利]一種細胞模型及其制備方法、應用

有效

• 申請號: 201810664195.8
• 申請日: 2018-06-25
• 公開（公告）號: CN110628821B
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 陳志國;王淑艷;徐大為
• 申請（專利權）人: 首都醫科大學宣武醫院
• 主分類號: C12N15/86
• 分類號: C12N15/86;C12N5/10;C12Q1/02
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 李靜

1.一種利用沃納綜合征（WS）患者的體細胞誘導多能干細胞的方法，其特征在于，包括如下步驟：

S1、源于WS患者的體細胞的獲取；獲取的WS體細胞為成纖維細胞AG03141；

S2、將同時表達人端粒酶逆轉錄酶和抗性基因的載體轉染至所述體細胞中并進行培養，篩選出能夠表達人端粒酶逆轉錄酶的所述體細胞；所述表達人端粒酶逆轉錄酶的骨架載體為慢病毒載體；所述的慢病毒載體為pLVX-Tight-Puro；

S3、向S2步驟中篩選的所述體細胞中轉染攜帶有誘導iPSCs的重編程基因的載體，并進行iPSCs培養；所述重編程基因為OCT4、 SOX2、c-MYC和 KLF-4；所述載體為仙臺病毒。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，在S2步驟中，在轉染表達人端粒酶逆轉錄酶的載體的同時轉染可調控外源基因表達的載體。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，在S2步驟中，用于所述調控外源基因表達載體的骨架載體為pLVX-Tet-on Advanced。

4.權利要求1-3任一項所述的方法制備得到的誘導多能干細胞，其命名為人誘導多功能干細胞，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCCNo.14895。

5.權利要求1-3任一項所述的方法制備得到的誘導多能干細胞或權利要求4所述的誘導多能干細胞在成年早衰癥、腫瘤、動脈粥樣硬化、糖尿病或骨質疏松癥的疾病發病機制研究或藥物篩選領域用途。

6.一種細胞模型，其特征在于，包括權利要求1-3任一項所述的方法制備得到的誘導多能干細胞或權利要求4所述的誘導多能干細胞。

7.權利要求6所述的細胞模型在成年早衰、腫瘤、動脈粥樣硬化、糖尿病或骨質疏松癥的疾病發病機制研究或藥物篩選領域用途。