[發明專利]一種一步法超低溫微藻保種技術在審
| 申請號: | 201810649758.6 | 申請日: | 2018-06-22 |
| 公開(公告)號: | CN110628635A | 公開(公告)日: | 2019-12-31 |
| 發明(設計)人: | 劉軍 | 申請(專利權)人: | 劉軍 |
| 主分類號: | C12N1/12 | 分類號: | C12N1/12;C12N1/04;C12R1/89 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 225000 江蘇省揚*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 保種 微藻 藻種 備用 培養皿 微藻懸浮液 超低溫 實驗材料 無菌操作 轉速離心 培養基 離心管 一步法 稱取 鄰域 清液 去除 上管 收藻 下管 液氮 藻液 制備 沉淀 懸浮 新鮮 污染 | ||
本發明提供了微藻保種技術鄰域內的一種一步法超低溫微藻保種技術,其先將藻液和實驗材料在無菌操作下在培養皿里,培養數天,然后離心收藻,加入新鮮的培養基再懸浮至所需密度,備用,稱取適量微藻懸浮液,倒入離心管,不添加其他試劑,以1000rpm轉速離心數次,去除下管清液,上管沉淀即為藻種,4℃保種備用,將藻種直接投入液氮(?196℃)中,保種;本發明的方法制備方法簡單,操作簡單,不易污染,保種時間較長。
技術鄰域
本發明涉及一種保種技術,特別涉及一種一步法超低溫微藻保種技術。
背景技術
微藻的營養豐富,在人們的生活和生產實踐中具有很廣援的應用,在微藻的培養和應用中,保種技術十分重要,大規模微藻產業僅僅靠培養微藻是不夠的,必須將藻種保存起來備用,才能滿足需要,但微藻個體小,難分離,容易在保種過程中出現藻種單細胞純種隨環境變化發生變異,喪失自身的生理活性和遺傳特性,所以藻種保存就顯得尤為重要困,目前藻種保種方法常采用繼代保種方法,操作重復且繁瑣,不斷傳代過程藻種易污染,保種時間較短。
發明內容
針對現有技術中的缺陷,本發明的目的在于克服上述現有技術中的不足之處,提供一種一步法超低溫微藻保種技術,制備方法簡單,操作簡單,不易污染,保種時間較長。
本發明的目的是通過以下技術方案實現的:一種一步法超低溫微藻保種技術,所述制備方法包括以下步驟:
(A1)藻種培養:藻種和實驗材料在無菌操作下培養數天,離心收藻,加入新鮮培養基再懸浮至所需密度,備用;
(A2)離心藻種:將新鮮藻種懸浮液適量倒入離心管,以一定轉速離心數次,去除上清液,下層沉淀即為藻種,4 ℃保存備用;
(A3)一步法超低溫保種:將藻種直接投入液氮(-196℃ )中,保種。
本發明首先將藻液和實驗材料在無菌操作下在培養皿里,培養數天,然后離心收藻,加入新鮮的培養基再懸浮至所需密度,備用,稱取適量微藻懸浮液,倒入離心管,不添加其他試劑,以1000rpm轉速離心數次,去除下管清液,上管沉淀即為藻種,4 ℃保種備用,將藻種直接投入液氮(-196℃ )中,保種;與現有技術相比,本發明的有益效果在于:該方法制備方法簡單,操作簡單,不易污染,保種時間較長。
作為本發明的進一步改進,所述離心轉速為1000rpm~5000rpm。
具體實施方式
實施例1
一種一步法超低溫微藻保種技術,為制備微藻保種,其按如下步驟進行:
(A1)藻種培養:先將藻液和實驗材料在無菌操作下在培養皿里,培養數天,然后離心收藻,加入新鮮的培養基再懸浮至所需密度,備用;
(A2)離心藻種:稱取5mL微藻懸浮液,倒入離心管,不添加其他試劑,以5000rpm轉速離心數次,去除下管清液,上管沉淀即為藻種,4 ℃保種備用;
(A3)一步法超低溫保種:將藻種直接投入液氮(-196℃ )中,保種。
實施例2
一種一步法超低溫微藻保種技術,為制備微藻保種,其按如下步驟進行:
(A1)藻種培養:先將藻液和實驗材料在無菌操作下在培養皿里,培養數天,然后離心收藻,加入新鮮的培養基再懸浮至所需密度,備用;
(A2)離心藻種:稱取5mL微藻懸浮液,倒入離心管,不添加其他試劑,以1000rpm轉速離心數次,去除下管清液,上管沉淀即為藻種,4 ℃保種備用;
(A3)一步法超低溫保種:將藻種直接投入液氮(-196℃ )中,保種。
實施例3
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