[發明專利]一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法

在審

• 申請號: 201810648907.7
• 申請日: 2018-06-22
• 公開（公告）號: CN108901822A
• 公開（公告）日: 2018-11-30
• 發明（設計）人: 喬保建;任代勝;付錫江;夏祥華;陶元平;彭沖
• 申請（專利權）人: 安徽袁糧水稻產業有限公司
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H1/04;A01H4/00
• 代理公司: 蕪湖思誠知識產權代理有限公司 34138
• 代理人: 楊濤

1.一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法，其特征在于：所述育種方法具體步驟如下：

(1)選用功能性水稻品種A、抗病水稻品種B、功能性水稻品種C、抗病水稻品種D，A和B雜交，C和D雜交，得到雜交F₁代，分別以F1-AB和F1-CD表示；

(2)種植雜交F1代，具體管理標準如下：

(2.1)合理密植，規范栽插：每畝9000窩，每窩三苗呈等邊三角形，苗間距10厘米，施足底肥，淺薄水栽秧；

(2.2)栽插后淺水濕潤灌溉返青分蘗，當分蘗總數達到成穗數的85％時自然斷水落干曬田；

(2.3)施肥:每畝施用純氮肥12～14kg，氮、磷、鉀比例為2:1:2，氮肥中底肥、分蘗肥和穗肥比例為5:3:1；磷肥作底肥，鉀肥則底肥、追肥各半；

(2.4)病蟲害防治：主要采用物理或農業防治方法防治一代二化螟，二代二化螟等害蟲，采用3％“井崗霉素”8g兌水30kg噴施一次防治紋枯病，采用破口前7天到破口期用“紋曲靈”250mL兌水30kg噴施一次；

(3)抽穗期取F1代幼穗進行花粉培養，分別采用病原體粗毒素處理，篩選具有抗病特性的F2-AB和F2-CD；

(4)大田移栽F2-AB和F2-CD，按步驟(2)的標準進行管理，開花期考察各株系并選擇農藝性狀、產量形狀優異的單株，成熟期單株收種F3-AB和F3-CD；

(5)依據品種A或C的功能性指標分別對F3-AB和F3-CD進行鑒定，篩選具有品種A或C功能性特征的F3-AB和F3-CD留種；

(6)對F3-AB和F3-CD進行雜交，得到F4-ABCD；

(7)種植F4-ABCD，按步驟(2)的標準進行管理，取幼穗進行花粉培養，同時采用品種B和D所對抗的病原體粗毒素處理，篩選具有抗病特性的F5-ABCD；

(8)大田移栽F5-ABCD，按步驟(2)的標準進行管理，開花期考察各株系并選擇農藝性狀、產量形狀優異的單株，成熟期單株收種F6-ABCD；

(9)篩選同時具有品種A和C功能性特征的F6-ABCD留種；

(10)驗證F6-ABCD：種植F6-ABCD，生長期同時接種B和D所對抗的病原體，成熟期單株收種，同時考察品種A和C具有的功能性特征，符合雙抗性雙功能性的標準即育成新品種DADF1或DADF2。

2.根據權利要求1所述的一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法，其特征在于，功能性水稻品種A和C的功能性指標包括抗性淀粉含量、水溶性蛋白含量、γ-氨基丁酸含量、鐵元素含量，抗病品種B和D的抗性包括抗稻瘟病、抗水稻胡麻葉斑病、抗條紋葉枯病、抗黑條矮縮病。

3.根據權利要求1所述的一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法，其特征在于，所述功能性水稻品種A為W025或宜糖1號、抗病水稻品種B為龍粳42或汴稻1號、功能性水稻品種C為IR164或W3660、抗病水稻品種D為關東194或IR24。

4.根據權利要求1所述的一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法，其特征在于，所述花粉培養的步驟如下：

(1)以稻苞大而不破、劍葉葉枕距為5～8cm、稻穗中部花藥位置占穎殼的1/3～1/2為標準取穗，取材后，用71％乙醇表面消毒，然后濕潤的紗布包裹整個稻穗，保持稻穗濕潤，在4℃下低溫預處理4天；

(2)預處理后剪下稻苞，將稻苞浸泡于70％的酒精中處理3～5min，然后將該稻苞轉移于超凈工作臺中剝離稻穗，用消毒過的紗布包裹稻穗后用濃度為0.1％的升汞滅菌10min并間或搖動，無菌水漂洗3次，打開紗布晾干；

(3)無菌臺上剝除稻穗苞葉，選取合適的小穗剪下，用剪穎抖藥法將花藥接種至誘導培養基上，每個三角瓶越接種100個花藥；

(4)當誘導培養后的花藥愈傷組織長到3.5～7mm大小時，轉到分化培養基上誘導綠苗，培養條件為恒溫27℃，恒濕69％，避光12h/光照2250Lx 14h。

5.根據權利要求1所述的一種雙抗性雙功能性水稻的高效育種方法，其特征在于，所述病原體粗毒素處理具體步驟如下：

挑選直徑3.5～7mm的花藥愈傷組織接種于添加粗毒素選擇壓的分化培養基，在溫度27～28℃、濕度69～70％、光12h/暗12h的條件下培養，獲得花培幼苗，待花培苗長到2.5cm后轉接與生根培養基進行繼代培養，待長到9cm后移栽到周轉箱壯苗，10～20天后移栽入大田。