[發(fā)明專利]一種鑒定缺血性卒中病因亞型的microRNA標志物組合及其用途

有效

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• 申請日: 2018-06-21
• 公開（公告）號: CN108728530B
• 公開（公告）日: 2021-02-09
• 發(fā)明（設計）人: 桂雅星
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12N15/11
• 代理公司: 長沙星耀專利事務所(普通合伙) 43205
• 代理人: 許伯嚴

本發(fā)明提供一種鑒定缺血性卒中的病因亞型的microRNA標志物組合，包括miR?125b、miR?125a、miR?let?7b、miR?let?7e、miR?7?2?3p和miR?1908中的至少1種，及其在制備用于鑒定缺血性卒中的病因亞型的試劑中的用途和在制備用于預測受試者卒中風險的試劑中的用途。本發(fā)明還提供一種試劑盒，包括能夠檢測所述標志物組合的含量的試劑。使用本發(fā)明的上述microRNA標志物組合，對缺血性卒中進行分型具有操作簡單安全，高靈敏性，高特異性以及易于大量分型的特點。

技術領域

本發(fā)明屬于精準診斷領域，具體地涉及一種缺血性卒中的病因亞型的microRNA標志物及其應用。

背景技術

缺血性卒中(IS)是發(fā)達國家死亡和長期殘疾的主要原因，約80％的卒中是缺血性的。在中國，每年有250萬人卒中和100萬人因卒中相關原因死亡。缺血性卒中是一種高度異質(zhì)性疾病。絕大多數(shù)急性冠狀動脈綜合征是由于大中動脈粥樣硬化。而缺血性卒中也可能是由于其他病因，包括顱內(nèi)小血管疾病、心源性栓塞及血液疾病等。缺血性卒中的預后和處理與缺血性損傷的具體機制直接相關。比較特定缺血性卒中機制的臨床特征、功能結果和死亡率可能使臨床醫(yī)生能夠識別那些風險較高的患者，并更明確地評估治療策略。對急性腦梗死患者亞型的正確分類對于早期治療和預測預后至關重要。

MicroRNAs(miRNAs)是一類非編碼的小分子RNA(約22個核苷酸長度)，是轉(zhuǎn)錄后水平強有力的基因表達調(diào)控因子。miRNA參與大量的生理和病理過程，如神經(jīng)元死亡、變性或缺血性卒中。例如，miR-146aG等位基因和miR-146aG/-149T/-196a2C/-499G等位基因組合與缺血性卒中發(fā)病相關。MicroRNA-195通過其在大鼠中的抗淀粉樣變性作用來防止慢性腦灌注不足導致的癡呆。Jeyaseelan等首次報道了miRNA參與調(diào)節(jié)SD大鼠大腦中動脈閉塞(MCAo)相關發(fā)病機制，表明miR-30a-3p在24小時再灌注的MCAo大鼠腦中下調(diào)而在隨后的48小時再灌注期間上調(diào)。最近的研究表明，青年腦卒中患者內(nèi)皮特異性miRNA-miR-126下調(diào)。此外，let-7激活導致中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷的Toll樣受體7。然而，血漿循環(huán)miRNA的表達尚未在不同的缺血性卒中亞型中進行評估。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述技術問題的至少一個，發(fā)明人進行了一項系統(tǒng)性基因陣列研究，研究了不同缺血性卒中亞型，發(fā)現(xiàn)細胞外循環(huán)miRNA在缺血性卒中亞型中差異表達，缺血性卒中亞型[CARD，LAA，LAC和SUE]影響生物通路，發(fā)明人進一步驗證了不同組缺血性卒中亞型中的幾種血清miRNA，并且這些循環(huán)miRNA在卒中前和卒中后進一步檢測到差異表達，從而完成本發(fā)明。

為此，本發(fā)明的一方面提供一種鑒定缺血性卒中的病因亞型的microRNA標志物組合，包括miR-125b、miR-125a、miR-let-7b、miR-let-7e、miR-7-2-3p和miR-1908中的至少1種，優(yōu)選地，包括至少2種、3種、4種、5種或6種。

在本發(fā)明的實施方案中，所述缺血性卒中的病因亞型包括選自心源性栓塞(CARD)、大動脈粥樣硬化(LAA)、腔隙性腦梗死(LAC)和未確定病因?qū)W卒中(SUE)中的至少1種。

在本發(fā)明的一個具體實施方案中，所述缺血性卒中的病因亞型包括為CARD，所述microRNA標志物組合包括miR-125b、miR-125a、miR-let-7b、miR-let-7e中的至少1種，優(yōu)選地，包括至少2種、3種或4種，更優(yōu)選地，包括4種。

在本發(fā)明的另一個具體實施方案中，所述缺血性卒中的病因亞型為LAA、LAC和SUE中的至少1種，優(yōu)選地，包括至少2種或3種，更優(yōu)選地，包括至少2種，最優(yōu)選地，所述缺血性卒中的病因亞型為LAA和LAC，所述microRNA標志物組合包括miR-7-2-3p和miR-1908中的至少1種，優(yōu)選地，包括2種。