[發(fā)明專利]一種siRNA在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810636193.8
• 申請日: 2018-06-20
• 公開（公告）號: CN108753784B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 王新興;陳照立;王尚;劉偉麗;王天輝;段瑞鋒;杲修杰;蒲玲玲;鄧炳楠
• 申請（專利權(quán)）人: 軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院環(huán)境醫(yī)學(xué)與作業(yè)醫(yī)學(xué)研究所
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K31/7105;A61P9/00
• 代理公司: 天津市北洋有限責(zé)任專利代理事務(wù)所 12201
• 代理人: 李素蘭

本發(fā)明公開一種siRNA在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用，所述siRNA的正義鏈的核苷酸序列用SEQ ID No.1所示，所述siRNA的反義鏈的核苷酸序列用SEQ ID No.2所示。本發(fā)明的siRNA能明顯特異性抑制熱應(yīng)激心肌細胞內(nèi)microRNA?126的表達，給予心肌細胞轉(zhuǎn)染包含上述siRNA的腺病毒后，明顯抑制熱應(yīng)激所致心肌細胞的線粒體功能紊亂，顯著降低熱應(yīng)激心肌細胞的凋亡率，從而起到保護熱應(yīng)激心肌細胞的作用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種抑制microRNA-126表達的siRNA及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

近年來，隨著地球生態(tài)環(huán)境的不斷惡化，全球變暖已成為難以逆轉(zhuǎn)的氣候趨勢。極端高熱氣候不僅在熱帶和亞熱帶地區(qū)持續(xù)加劇，而且在許多溫?zé)釒У貐^(qū)頻發(fā)。我國廣東地區(qū)、東南沿海及南海諸島等屬熱帶地區(qū)，長夏暖冬，夏季炎熱多濕。尤其是南海諸島，四周環(huán)海，處于典型的熱帶海洋氣候，空氣中的相對濕度高達100％，而且常年氣溫30℃以上多達8個月。隨著我國基礎(chǔ)建設(shè)和重工業(yè)的飛速發(fā)展，在鋼鐵工業(yè)、鐵路建設(shè)、澆鑄車間等行業(yè)從事高溫作業(yè)的人群也大幅增加；因此，探索高溫環(huán)境條件下機體作業(yè)能力下降生理、病理學(xué)基礎(chǔ)，發(fā)現(xiàn)有效防治環(huán)境高熱所致健康損害和作業(yè)能力下降的醫(yī)藥措施，對于高熱環(huán)境中作業(yè)和生活人群具有重要意義。

高溫環(huán)境下作業(yè)時，炎熱的外環(huán)境使機體散熱困難，甚至被迫接受大量的外加熱，可引起一系列的生理、病理性的應(yīng)激反應(yīng)，稱為熱應(yīng)激。對于高溫環(huán)境中的作業(yè)人員而言，體溫調(diào)節(jié)貫穿著整個熱應(yīng)激的全過程(包括代償期和失代償期)，而心血管系統(tǒng)在體溫調(diào)節(jié)中扮演了重要的角色。熱應(yīng)激時，心血管系統(tǒng)處于高度的緊張狀態(tài)，機體為適應(yīng)散熱和供氧的雙重需要，體溫調(diào)節(jié)中樞在內(nèi)、外熱刺激的作用下，皮膚血管的交感神經(jīng)活動減弱，導(dǎo)致皮膚血管高度擴張；而支配心臟的神經(jīng)末梢釋放兒茶酚胺類物質(zhì)作用于心臟的β-腎上腺素受體，導(dǎo)致心臟的收縮頻率和強度迅速增加，使得體內(nèi)蓄積的熱量通過血液迅速向體外發(fā)散。心血管系統(tǒng)的這一系列活動在增加散熱的同時，由于心臟的收縮強度、頻率、每分輸出量的迅速增加，其所承受的負荷也迅速升高；此時心肌細胞代謝活躍，需氧量急劇增加，而供氧量卻相對不足，導(dǎo)致心肌處于超負荷狀態(tài)。心臟功能的有效保護已經(jīng)成為目前高溫作業(yè)環(huán)境醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中亟待解決的問題之一。

目前，預(yù)防熱應(yīng)激心肌損傷的主要手段是合理補充電解質(zhì)和水分，防止心律失常發(fā)生。補充電解質(zhì)和水分只能起到防護心率失常的作用，而對漸進性的熱應(yīng)激心肌細胞損傷和凋亡的防護作用則十分有限。對于熱應(yīng)激心肌損傷的治療目前主要以臨床心臟內(nèi)科的抗心肌缺血或者抗心肌梗死的藥物為主，也有一些基于中醫(yī)理論的對癥治療中藥制劑。這些藥物和中藥制劑由于是非特異性對癥治療藥物，導(dǎo)致它們以緩解癥狀為主，不能從根本上有效阻斷熱應(yīng)激心肌細胞損傷的細胞內(nèi)信號通路，治療效果十分有限；與此同時，不可避免的會引起一系列的毒副作用。到目前為止，國內(nèi)外尚缺乏針對熱應(yīng)激所致心肌損傷的特異性防護藥物。

以往對microRNA-126(miR-126)的研究主要集中在其對腫瘤、血管內(nèi)皮細胞等功能的調(diào)控方面。而對熱應(yīng)激心肌細胞內(nèi)miR-126的表達規(guī)律和功能則未見研究。此外，目前也并沒有發(fā)現(xiàn)針對miR-126對抗熱應(yīng)激心肌細胞損傷的相關(guān)技術(shù)的報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種siRNA在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種包含siRNA的腺病毒載體在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下：

一種siRNA在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用，siRNA的正義鏈的核苷酸序列用 SEQ ID No.1所示，siRNA反義鏈的核苷酸序列用SEQ ID No.2所示。

一種包含siRNA的腺病毒載體在制備抗熱應(yīng)激心肌損傷藥物中的應(yīng)用，siRNA的正義鏈的核苷酸序列用SEQ ID No.1所示，siRNA的反義鏈的核苷酸序列用SEQ ID No.2所示。