[發明專利]一種草莓花青苷相關基因FvMYB17及其應用

有效

• 申請號: 201810632980.5
• 申請日: 2018-06-19
• 公開（公告）號: CN108795950B
• 公開（公告）日: 2021-04-13
• 發明（設計）人: 張俊祥;石偉佳;張志宏;王保田;雷瑩瑩;于雙
• 申請（專利權）人: 沈陽農業大學
• 主分類號: C12N15/29
• 分類號: C12N15/29;C12N15/82;A01H5/00;A01H6/20
• 代理公司: 佛山粵進知識產權代理事務所(普通合伙) 44463
• 代理人: 張敏

本發明屬于分子生物學中的基因工程領域，具體涉及一種草莓花青苷相關基因FvMYB17及其應用，FvMYB17的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2所示；研究表明該基因具有促進擬南芥花青苷合成的功能。本發明為利用基因工程技術，對果實色澤的調控提供了理論依據與技術手段，具有很大的應用價值。

技術領域

本發明屬于分子生物學、基因工程技術領域，具體涉及一種草莓花青苷相關基因FvMYB17及其應用。

背景技術

草莓是多年生草本植物，薔薇科草莓屬，是世界上消費量最大的漿果之一。草莓屬于生長周期短、容易繁殖、植株較小、方便管理的一種水果(譚昌華等，2003)。由于草莓果實特殊的香氣和極高的營養價值，因此受到廣大消費者的喜愛。草莓果實中存在著大量花青苷，從而導致果實顏色的變化。同時MYB轉錄因子在植物的次生代謝中有極其重要的作用。

MYB轉錄因子因其含有一段保守的Myb結構域而得名，它的N端是高度保守的，且含有不完全重復的串聯的1-3個R結構域，即R1、R2和R3。根據所含R數量不同可將其分為以下4類：1R-MYB(MYB-related)，R2R3-MYB，3R-MYB，4R-MYB(牛義嶺等，2016)。每個R可形成3個α-螺旋，其中第2、3個α-螺旋形成螺旋-轉角-螺旋(王希慶等，2003)，第三個螺旋可以識別染色體的大溝。每一個MYB結構域中含有17-19個氨基酸間隔開的3個保守的色氨酸殘基，它們具有疏水作用并且對維持螺旋-轉角-螺旋有重要的作用。

模式植物擬南芥中R2R3-MYB家族的第四亞族包括AtMYB3、AtMYB4、AtMYB6和AtMYB7基因。Jin(2000)發現AtMYB4擬南芥突變體對UV-B的耐受性增強。與上述基因同源的另一個基因AtMYB7在擬南芥中也可能作為一個新的紫外線保護因子(Fornaléet al.，2014)。通過前人研究可以看出，擬南芥MYB家族的第四亞組中主要在負調控類黃酮和紫外線保護有重要作用。但是我們發現草莓FvMYB17能夠促進花青苷的合成，這與模式植物擬南芥中同源基因的功能完全不同。對該基因進行功能研究，闡明其花青苷調控機理，可以有利于在分子方面了解草莓花青苷的合成。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術的不足，提供一種花青苷合成基因-草莓基因FvMYB17及其應用。本發明的技術方案是從二倍體森林草莓‘Ruegen’中分離得到FvMYB17基因,構建該基因的植物過表達載體，通過農桿菌介導法，將該基因轉化到擬南芥中，以實現FvMYB17基因的功能分析。

本發明提供了一種草莓花青苷相關基因FvMYB17，該基因的cDNA序列如SEQ NO.1所示；草莓花青苷合成相關基因FvMYB17編碼的蛋白質，所述基因編碼的氨基酸序列如SEQID NO：2所示；

本發明提供一種用于擴增草莓花青苷相關基因FvMYB17的引物，包含：

FvMYB17-F:5＇－AAAGGTACCATGAGGAAACCCTGCTGCGA－3＇

FvMYB17-R:5＇－AAAGAATTCTCTGAAGAGAGGAAGCGTGG－3＇

其中，引物5＇端的前3個堿基為保護堿基，緊接著的6個堿基是酶切位點，5＇端前9個堿基是構建過表達載體所需，不屬于FvMYB17的基因序列。FvMYB17-R引物由于構建GFP融合表達載體需要，去掉了終止密碼子。

本發明提供一種草莓花青苷相關基因FvMYB17的植物過表達載體，所述載

體為pRI101-GFP-CaMV35S-FvMYB17。

本發明提供一種草莓花青苷相關基因FvMYB17在提高植物花青苷含量的應用。

本發明提供一種表達載體pRI101-GFP-CaMV35S-FvMYB17在提高植物花青苷含量的應用。