[發明專利]一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架及其制備方法和應用在審
| 申請號： | 201810626875.0 | 申請日： | 2018-06-19 |
| 公開（公告）號： | CN109054049A | 公開（公告）日： | 2018-12-21 |
| 發明（設計）人： | 劉陽;楊雯霏;張佩;張偲瑤;李蓉;賀艷 | 申請（專利權）人： | 南華大學 |
| 主分類號： | C08J3/075 | 分類號： | C08J3/075;C08L51/10;C08F290/06;C08F220/28;C08F222/38;A61L27/18;A61L27/52;A61L27/58;C12N5/00 |
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| 地址： | 421001 湖*** | 國省代碼： | 湖南;43 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 溫敏水凝膠 三維細胞支架 制備方法和應用 細胞 制備 水溶性大分子 細胞體外培養 組織工程材料 表面活性劑 丙烯酸酯類 共聚單體 聚合單體 納米凝膠 時間維持 時間延長 細胞損害 支架生物 腫瘤治療 組織修復 常溫下 傳統的 交聯劑 可降解 熱誘導 溫敏性 相容性 乙二醇 引發劑 包埋 側鏈 寡聚 可調 支架 脫水 增殖 收縮 生長 應用 | ||
1.一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）將含有寡聚乙二醇（PEG）側鏈的丙烯酸酯類水溶性大分子聚合單體、表面活性劑、交聯劑和/或共聚單體混合形成反應液，除氧后，加入引發劑，在加熱條件下發生自由基聚合反應得到PEG類溫敏性納米凝膠；
（2）將步驟（1）得到的PEG類溫敏性納米凝膠經透析提純后，采用PBS緩沖液配置成一定質量分數的納米凝膠溶液，與一定濃度的種子細胞懸浮液進行均勻混合，升高溫度，通過熱誘導原位包埋細胞，形成PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架。
2.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中含有寡聚乙二醇（PEG）側鏈的丙烯酸酯類水溶性大分子聚合單體為聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯和2-甲基-2-丙烯酸-2-（2-甲氧基乙氧基）乙酯，聚乙二醇甲醚甲基丙烯酸酯的質量為2-甲基-2-丙烯酸-2-（2-甲氧基乙氧基）乙酯質量的0～50%。
3.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中的交聯劑為N,N'-亞甲基雙丙烯酰胺（BIS），乳化劑為十二烷基硫酸鈉（SDS），引發劑為過硫酸銨（APS）或過硫酸鉀（KPS）中的任意一種，質量分別為含有寡聚乙二醇（PEG）側鏈的丙烯酸酯類水溶性大分子聚合單體質量的1~15%、0~3%、2~6%。
4.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中的共聚單體為丙烯酸、甲基丙烯酸、烯丙基磺酸鈉、烯丙基胺等水溶性的含羧基、磺酸基或氨基的可聚合單體，質量為含有寡聚乙二醇（PEG）側鏈的丙烯酸酯類水溶性大分子聚合單體質量的0～4%。
5.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中反應液中聚合單體的質量分數為2～6%；聚合反應溫度為50～90℃；反應時間為3～12h。
6.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（1）中反應得到PEG類溫敏性納米凝膠具有良好的溫度敏感性，體積相轉變溫度在26~37℃，20℃時其粒徑在100~1000nm。
7.如權利要求1所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的制備方法，其特征在于，所述步驟（2）中納米凝膠溶液的質量分數為1~10%，細胞懸浮液的濃度為1×105~5×106個/mL，熱誘導形成溫敏水凝膠三維細胞支架的溫度為26~37℃。
8.一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架，其是通過權利要求1～7所述的制備方法制備得到的；所述PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架在生理溫度時隨時間延長脫水收縮程度很小，能夠長時間維持種子細胞的生長和增殖。
9.如權利要求1～8任一所述的一種PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架的應用，其特征在于，所述PEG類溫敏水凝膠三維細胞支架用于細胞體外培養、組織修復、腫瘤治療等領域。
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