[發(fā)明專利]一種抗癌天然產(chǎn)物藤黃酸的納米制劑及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810626412.4
• 申請(qǐng)日: 2018-06-15
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108619094A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-10-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡璐璐;鞏長(zhǎng)旸;童榮生;王強(qiáng);余繼英;王巖
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 四川省人民醫(yī)院;四川大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/107
• 分類號(hào): A61K9/107;A61K47/69;A61K31/352;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 四川力久律師事務(wù)所 51221
• 代理人: 陳明龍

本發(fā)明涉及醫(yī)藥制劑及高分子材料領(lǐng)域，具體公開(kāi)了一種抗癌天然產(chǎn)物藤黃酸的納米制劑，該納米制劑包含甲氧基聚乙二醇?聚己內(nèi)酯聚合物(mPEG?PCL)和藤黃酸，并由甲氧基聚乙二醇?聚己內(nèi)酯以膠束形式包載藤黃酸形成，其中，所述藤黃酸與聚乙二醇?聚己內(nèi)酯的質(zhì)量比為1∶5?300。實(shí)驗(yàn)研究表明，當(dāng)選用特定的生物相容性材料mPEG?PCL包裹藤黃酸，并結(jié)合兩者之間用量關(guān)系的優(yōu)選限定，可顯著提高藤黃酸水中分散度，提高藥物的生物利用度和成藥性，并通過(guò)被動(dòng)靶向作用顯著提高滕黃酸的抗腫瘤效果，降低毒副作用，節(jié)省治療成本。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥制劑及高分子材料領(lǐng)域，具體涉及一種抗癌天然藥物藤黃 酸的新型納米制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

藤黃酸是從藤黃科植物藤黃中提取的活性成分之一，具有止血、抗炎、解 毒、驅(qū)蟲(chóng)等藥用價(jià)值，在國(guó)外還被用作利尿劑，治療水腫和腦出血時(shí)的血壓升 高，已被收入《美國(guó)藥典》第10版。近些年來(lái)，國(guó)內(nèi)藥理學(xué)研究發(fā)現(xiàn)藤黃酸在 多種腫瘤中具有強(qiáng)大的抗腫瘤活性，如白血病、肝癌、頭頸部腫瘤、乳腺癌、 胃癌、胰腺癌、前列腺癌、宮頸癌和肺癌等，其作用機(jī)制主要包括誘導(dǎo)腫瘤細(xì) 胞凋亡、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、抗腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移、抑制通道蛋白活性、逆轉(zhuǎn)腫瘤 細(xì)胞多藥耐藥性等多方面綜合作用。

其中，現(xiàn)有研究表明藤黃酸抗腫瘤作用機(jī)制是多方面的，主要有誘導(dǎo)腫瘤 細(xì)胞凋亡、抑制細(xì)胞周期、影響癌基因和抑癌基因及其相關(guān)蛋白的表達(dá)等。在 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡方面，崔國(guó)惠等觀察不同濃度藤黃酸(0.125～8.0μmol/L)對(duì) K562細(xì)胞生長(zhǎng)抑制的情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)藤黃酸能明顯抑制K562細(xì)胞增殖，其24 h的IC₅₀為(2.637±0.208)μmol/L。洪鐵艷等以人MDS-RAEB細(xì)胞株MUTZ-1 細(xì)胞為研究對(duì)象考察藤黃酸的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明，藤黃酸可抑制MUTZ-1細(xì) 胞的生長(zhǎng)，0.4、0.6、0.8μg/mL的細(xì)胞凋亡率分別為(13±0.5)％、(37±0.7)％ 和(56±0.6)％，且凋亡率隨著藥物濃度增加而增加。藤黃酸還可誘導(dǎo)乳腺癌細(xì) 胞T47D的凋亡。在抑制細(xì)胞周期方面，舒文秀等研究表明藤黃酸能阻滯U937 細(xì)胞于G₀/G₁期，從而誘導(dǎo)U937細(xì)胞凋亡，且抑制作用呈時(shí)間劑量依賴關(guān)系， 其24h的IC₅₀為(1.019±0.134)mg/L。劉靜冰等研究藤黃酸對(duì)胰腺癌細(xì)胞株 PC-3的抑制作用，流式細(xì)胞術(shù)分析發(fā)現(xiàn)藤黃酸可阻滯細(xì)胞周期于S期，且抑制 作用與作用時(shí)間有一定的依賴關(guān)系，作用時(shí)間越長(zhǎng)抑制率越高，而藥物濃度與 抑制率關(guān)系不明顯。在影響癌基因和抑癌基因及其相關(guān)蛋白的表達(dá)方面，盧娜 等采用cDNA基因芯片及RT-PCR技術(shù)檢測(cè)藤黃酸影響SMMC-7721基因表達(dá)情 況，結(jié)果表明藤黃酸作用于SMMC-7721，24h后，有31個(gè)基因改變，48h后有 56個(gè)基因改變。黃愷飛等分析藤黃酸對(duì)胃癌細(xì)胞Survivin基因表達(dá)的影響。結(jié) 果表明藤黃酸對(duì)BGC-803細(xì)胞的抑制率與藥物濃度和作用時(shí)間呈依賴關(guān)系，其 可下調(diào)Survivin蛋白表達(dá)。王勇等發(fā)現(xiàn)藤黃酸能明顯抑制Raji細(xì)胞增殖，推測(cè) 可能是通過(guò)下調(diào)Cyclin D3、Cyclin E和NF-κB蛋白表達(dá)，阻滯細(xì)胞周期進(jìn)程， 從而產(chǎn)生抗腫瘤作用。張洪明等采用Western-blotting技術(shù)檢測(cè)不同濃度的藤黃 酸作用肺腺癌SPC-A-1細(xì)胞Caspase9、Caspase10及p53蛋白表達(dá)的變化，結(jié)果表明Caspase9、Caspase10及p53均參與了藤黃酸誘導(dǎo)SPC-A-1細(xì)胞凋亡，且隨 著藤黃酸濃度的增高，Caspase9、Caspase10及p53蛋白的表達(dá)均上調(diào)。許曉源 等通過(guò)Westernblotting方法檢測(cè)藤黃酸對(duì)A375細(xì)胞作用過(guò)程中Bcl-2和Bax蛋 白表達(dá)情況。結(jié)果在給藥24、36和48h后，IC_s0值分別為(1.57±0.05)、(1.31 ±0.20)和(1.12±0.19)μg/mL，不同濃度藤黃酸(2.5～7.5μg/m L)處理36h 后，早期凋亡細(xì)胞數(shù)量以劑量依賴性方式增加27.6％～41.9％，同時(shí)，可下調(diào)Bcl-2 蛋白表達(dá)，上調(diào)Bax蛋白表達(dá)。黃愷飛研究發(fā)現(xiàn)藤黃酸對(duì)胃癌細(xì)胞BGC-803有 明顯的生長(zhǎng)抑制作用，可顯著促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡和抑制腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移，其機(jī)制 與下調(diào)Bc1-2、ICAM-1及上調(diào)Bax的表達(dá)有關(guān)。