[發明專利]骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 201810620827.0
• 申請日: 2018-06-15
• 公開（公告）號: CN108753829B
• 公開（公告）日: 2021-06-29
• 發明（設計）人: 騫愛榮;高永光;藺梟;胡麗芳;張文娟;羅曉慶;趙欣;李迪杰
• 申請（專利權）人: 西北工業大學;西安九清生物科技有限公司
• 主分類號: C12N15/87
• 分類號: C12N15/87;C08G73/02
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 郭永麗

1.一種骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體，所述樹形高分子轉基因載體的結構式(I)如下：

式(I)中，R為樹形高分子，a為與樹形高分子表面共價連接的萘酰亞胺基團的數量，b為與樹形高分子表面共價連接的骨靶向肽的數量。

2.如權利要求1所述的骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體，其中，R的結構式(II)如下：

式(II)中，M為乙二胺；n＝6；m＝2。

3.如權利要求1所述的骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體，其中，a＝1～128，b＝1～128。

4.一種制備權利要求1～3任一項所述的骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體的方法，其合成路線如下：

其中，所述方法具體步驟包括：

步驟一、按比例稱取樹形高分子R與式2化合物，加入溶劑溶解，室溫攪拌反應，反應結束后，減壓濃縮，分離得到式3化合物；

步驟二、所述步驟一得到的式3化合物、式4化合物、催化劑、縮合劑與有機堿在有機溶劑中反應，反應結束后，冷分離得到式5化合物；

步驟三、將所述步驟二得到的式5化合物、對甲基苯酚、三氟乙酸和乙二硫醇在有機溶劑或水中反應，反應結束后，減壓濃縮，分離得到骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體(I)。

5.如權利要求4所述的方法，其中，在所述步驟一中，所述樹形高分子R和式2化合物的物質的量的比為1:10，反應時間為8小時，溶劑為乙醇，分離具體為：采用乙醇和水為溶劑利用分子量為3500的層析袋層析。

6.如權利要求4所述的方法，其中，在所述步驟二中，所述式3化合物與所述式4化合物摩爾比分別為1:20，1:40或1:80，反應時間為20小時。

7.如權利要求4所述的方法，其中，在所述步驟二中，所述催化劑為1-羥基苯并三唑，所述縮合劑為1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亞胺鹽酸，所述有機堿為三乙胺。

8.如權利要求4所述的方法，其中，在所述步驟三中，所述三氟乙酸、對甲基苯酚、乙二硫醇與水的質量比為92.5:2.5:2.5:2.5。

9.如權利要求1～3中任一項所述的骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體在作為核酸分子輸送載體中的應用。

10.如權利要求9所述的骨靶向肽與萘酰亞胺修飾的樹形高分子轉基因載體在作為核酸分子輸送載體中的應用，其中，核酸分子為miRNA。