[發明專利]一種多糖及在CIK細胞培養方面的應用在審

申請號：	201810615943.3	申請日：	2018-06-14
公開（公告）號：	CN108864317A	公開（公告）日：	2018-11-23
發明（設計）人：	林仁周	申請（專利權）人：	林仁周
主分類號：	C08B37/00	分類號：	C08B37/00;C12N5/0783
代理公司：	暫無信息	代理人：	暫無信息
地址：	210023 江蘇省南京***	國省代碼：	江蘇;32
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摘要：
搜索關鍵詞：	乙醇復溶緩慢滴加無水乙醇凍干沉淀紫穗槐葉上清液粗多糖濾渣過濾收集濾液離心收集沉淀沉淀用水多糖溶液乙醇浸泡制備應用過濾
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【說明書】：

本發明公開了一種多糖及在CIK細胞培養方面的應用，制備方法包括：步驟S1、紫穗槐葉用95％乙醇浸泡，過濾收集濾渣；濾渣用水提取，過濾收集濾液；濾液加入95％乙醇，靜置，離心收集沉淀；沉淀用水復溶，冷凍干燥得到紫穗槐葉粗多糖；紫穗槐葉粗多糖配制成1％多糖溶液，緩慢滴加無水乙醇至乙醇濃度為30％，靜置離心，沉淀復溶凍干得F30組分；上清液中緩慢滴加無水乙醇至乙醇濃度達40％，靜置離心，沉淀復溶凍干得F40組分；上清液中緩慢滴加無水乙醇至乙醇濃度達50％，靜置離心，沉淀復溶凍干得F50組分；上清液中緩慢滴加無水乙醇至乙醇濃度達60％，靜置離心，沉淀復溶凍干得F60組分。

技術領域

本發明屬于化學領域，涉及一種多糖及在CIK細胞培養方面的應用。

背景技術

紫穗槐Amorpha fruticosa為豆科Leguminosae多年生落葉灌木，別名棉槐、椒條、棉條、穗花槐。花，清熱、涼血、止血；葉，微苦、涼，具有祛濕消腫功效，主治癰腫、濕疹、燒燙傷。原產美國東北部和東南部，系多年生優良綠肥，蜜源植物，耐瘠，耐水濕和輕度鹽堿土，又能固氮。現我國東北、華北、西北及山東、安徽、江蘇、河南、湖北、廣西、四川等省區均有栽培。枝葉作綠肥、家畜飼料；莖皮可提取栲膠，枝條編制簍筐；果實含芳香油，種子含油率10％，可作油漆、甘油和潤滑油之原料。栽植于河岸、河堤、沙地、山坡及鐵路沿線，有護堤防沙、防風固沙的作用。

近年來，對紫穗槐的化學成分和藥理活性研究的逐步深入，發現很多活性成分，在抗腫瘤、抗病毒、保肝、殺蟲等方面顯示出潛在的藥用價值。

發明內容

本發明的目的在于提供一種多糖及在CIK細胞培養方面的應用。

本發明通過下面的技術方案實現：

技術方案一：

一種用于促進CIK細胞增殖的多糖，重均分子量為322.3KDa。

上述多糖的制備方法，包括如下步驟：

步驟S1、紫穗槐葉粗多糖的制備

將紫穗槐葉剪碎，用體積分數95％乙醇溶液浸泡24h，料液比1:40，過濾收集濾渣；濾渣用水于85℃提取3次，每次2h，料液比1:25，合并提取液，過濾收集濾液；濾液真空濃縮至原有體積1/5，加入5倍體積95％乙醇，靜置24h，離心收集沉淀；沉淀用水復溶，冷凍干燥得到紫穗槐葉粗多糖；

步驟S2、紫穗槐葉分級多糖F30的制備

每10g紫穗槐葉粗多糖溶解于1L的去離子水中形成濃度為1％(w/v，g/mL)的多糖溶液，然后向溶液中緩慢滴加無水乙醇，并不斷攪拌使溶液至乙醇濃度為30％(v/v，mL/mL)，靜置24h，離心20min(4℃、10000×g)，沉淀復溶凍干得F30組分；

F30組分即為所述多糖。