[發明專利]一種快速檢測總RNA樣本中基因組DNA殘留的方法有效
| 申請號: | 201810612880.6 | 申請日: | 2018-06-14 |
| 公開(公告)號: | CN108754010B | 公開(公告)日: | 2022-05-13 |
| 發明(設計)人: | 袁素霞;劉春 | 申請(專利權)人: | 中國農業科學院蔬菜花卉研究所 |
| 主分類號: | C12Q1/6895 | 分類號: | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京路浩知識產權代理有限公司 11002 | 代理人: | 王文君;黃爽 |
| 地址: | 100081 北京市海淀區中關*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 快速 檢測 rna 樣本 基因組 dna 殘留 方法 | ||
1.一種快速檢測岷江百合總RNA樣本中基因組DNA殘留的方法,其特征在于,包括:
1)以岷江百合基因TIP41-like作為靶標,針對內含子序列設計PCR引物;
PCR引物如下:
LDRG-F:5'-CTCTTTTATGACGAGGTTGGTA-3'
LDRG-R:5'-CAGGGAAATCGGTCAGTGTT-3';
2)提取待測岷江百合的總RNA,以總RNA或其反轉錄得到的cDNA為模板,利用步驟1)的引物進行PCR擴增;
3)分析PCR擴增產物。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于,步驟3)中根據擴增條帶的有無來判斷總RNA樣本中是否有基因組DNA殘留。
3.根據權利要求2所述的方法,其特征在于,PCR反應體系為:RNA或cDNA 2μL,上、下游引物各0.5μL,2×Taq PCR Magic Mix 10μL,ddH2O 7μL;
PCR反應程序為:94℃預變性3min;94℃變性30s,58℃退火30s,72℃延伸1min,35個循環;72℃延伸5min。
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