[發明專利]3;3′-(3;5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素及其應用

在審

• 申請號: 201810607752.2
• 申請日: 2018-06-13
• 公開（公告）號: CN108774204A
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發明（設計）人: 辛佳佳;胡興斌;李明凱;尹文
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C07D311/56
• 分類號: C07D311/56;A61P35/02
• 代理公司: 西安恒泰知識產權代理事務所 61216
• 代理人: 史玫

本發明公開了3,3′?(3,5二氟苯亞甲基)?雙?4?羥基香豆素及其應用。本發明制備了3,3′?(3,4?二氯苯亞甲基)?雙?4?羥基香豆素并發現其具有良好的體外和體內活性，對于白血病腫瘤細胞具有較強的抑制作用，且該化合物毒性較小，安全性好。

技術領域

本發明涉及3,3′-(3,5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素用于制備抗白血病藥物的應用。

背景技術

白血病是一類造血干細胞惡性克隆性疾病。克隆性白血病細胞增殖失控、分化障礙和凋亡受阻，停滯在細胞發育的不同階段，抑制了正常造血功能。近年來，我國白血病的患病率為2.76/10萬，在惡性腫瘤死亡率中，白血病在男性和女性中分別居第6位和第8位，在兒童及35歲以下成人中居第l位。臨床上治療白血病的首選藥物為伊馬替尼和尼洛替尼，是酪氨酸激酶抑制劑。然而該類藥物只針對15-20％的費城染色體陽性Bcr-Abl融合基因的白血病患者療效較好，其耐藥問題也給臨床治療帶來了嚴峻挑戰。

發明內容

本發明的3,3′-(3,5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素化學結構如式Ⅰ所示。發明人研究意外發現3,3′-(3,5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素具有抗白血病的活性，基于該發現，本發明提供了3,3′-(3,5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素用于制備抗白血病藥物的應用。

相對于現有技術，本發明屬于意外發現，所發現的3,3′-(3,4-二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素具有良好的體外和體內抗白血病活性，且該化合物毒性較小，安全性好。

附圖說明

圖1為50μg/ml 3,3′-(3,5二氟苯亞甲基)-雙-4-羥基香豆素(化合物2)處理K562細胞12和24小時后殺死腫瘤細胞的形態圖；

圖2化合物2對K562細胞增殖的抑制作用分析結果；

圖3為不同濃度化合物2處理K562細胞24小時后的流式細胞圖；

圖4為不同濃度化合物2處理K562細胞24小時后對細胞凋亡影響的分析結果；

圖5為50μg/ml化合物2處理K562細胞24小時后誘導細胞凋亡的透射電鏡圖；

圖6不同濃度化合物2誘導慢性粒細胞白血病動物骨髓細胞凋亡的結果；A為慢性粒細胞白血病模型小鼠的骨髓細胞收集示意圖；B為化合物2對細胞凋亡影響的流式細胞檢測圖；C為化合物2誘導白血病模型小鼠和正常對照小鼠骨髓細胞凋亡的結果分析；

圖7化合物2與伊馬替尼聯合給藥誘導白血病模型動物骨髓細胞凋亡的流式細胞圖；

圖8化合物2與伊馬替尼聯合給藥誘導白血病模型動物骨髓細胞凋亡的分析結果；

圖9化合物2與伊馬替尼單獨或聯合給藥后白血病模型動物生存曲線圖。

具體實施方式

以下是發明人提供的具體實施例，以對本發明的技術方案做進一步解釋說明。

實施例1：本發明的化合物的合成路線及方法

R＝H、3,5-2F、3,5-2Cl、3,5-2Br、3,5-2OCH₃或3,4-2CF₃。

合成方法：

將20mmol 4-羥基香豆素和100mL無水乙醇混合后加熱至4-羥基香豆素溶解后，加入10mmol系列含有不同取代基芳香醛類(化合物R＝H的合成方法沒有該步驟)，加熱回流，有白色固體顆粒析出，繼續加熱，待反應結束，冷卻、抽濾，再用乙醇重結晶，最終得純白色顆粒狀結晶。