[發明專利]一種混合益生菌的發酵生產方法

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• 申請號: 201810605437.6
• 申請日: 2018-06-13
• 公開（公告）號: CN108707568A
• 公開（公告）日: 2018-10-26
• 發明（設計）人: 李金嶺;孫雙林;李金波;李洪玉
• 申請（專利權）人: 河北康泰藥業有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/225;C12R1/25;C12R1/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及藥品發酵生產技術領域，特別是涉及一種混合益生菌的發酵生產方法，本發明的發酵生產方法適合混合益生菌發酵的工藝流程，同時提高了益生菌的活力，并且易于規模化工業生產；其包括以下步驟：(1)、準備接種菌種：鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、戊糖片球菌和乳酸片球菌混合益生菌；準備原料：葡萄糖、低聚果糖、黃原膠、檸檬酸、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、半胱氨酸鹽酸鹽、吐溫80、醋酸鈉、硫酸錳、磷酸氫二鉀、牛奶和水；(2)、發酵液制備：添加牛奶10％，黃原膠0.02％，檸檬酸1％，牛肉膏2％，蛋白胨2％，酵母膏1％，半胱氨酸鹽酸鹽0.05％，吐溫80為0.01％，醋酸鈉0.5％，硫酸錳0.02％，磷酸氫二鉀0.2％，其余為水。

技術領域

本發明涉及藥品發酵生產技術領域，特別是涉及一種混合益生菌的發酵生產方法。

背景技術

眾所周知，益生菌是指當攝入足夠的劑量時可以對宿主產生有益影響的活的微生物。目前，全球對益生菌及其相關制劑的研究日益受到重視，益生菌在食品、營養品及醫藥領域的研究也不斷深入，益生菌的免疫調節機制主要包括黏膜屏障作用、增強單核—巨噬細胞的吞噬作用等。此外，益生菌還應用于臨床相關疾病的治療，改善受損肝臟的功能，緩解腸易激綜合征的臨床癥狀，通過調節脂肪代謝及胰島素敏感性預防2型糖尿病的發生，預防結直腸腫瘤細胞生長及減輕腸道炎癥等。鼠李糖乳桿菌(Lactobacillus rhamnose)，植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)，副干酪乳桿菌(Lactobacillus paracasei)，戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)，乳酸片球菌(Peeltococcus acitilactict)等是國家認可的第3代益生菌，可以黏附于腸道上皮細胞并定殖于人體，顯著改善腸道菌群結構，可提高人體免疫能力，緩解腸道疾病等等。但混合益生菌中每個菌種的最佳發酵條件不同，很難整合到一起進行發酵量產。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種適合混合益生菌發酵的工藝流程，同時提高了益生菌的活力，并且易于規模化工業生產的混合益生菌的發酵生產方法。

本發明的一種混合益生菌的發酵生產方法，包括以下步驟：

(1)、準備接種菌種：鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、戊糖片球菌和乳酸片球菌混合益生菌；準備原料：葡萄糖、低聚果糖、黃原膠、檸檬酸、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、半胱氨酸鹽酸鹽、吐溫80、醋酸鈉、硫酸錳、磷酸氫二鉀、牛奶和水；

(2)、發酵液制備：培養基添加了葡萄糖2％做為主要碳源，低聚果糖0.05％為輔助碳源；同時添加牛奶10％，黃原膠0.02％，檸檬酸1％，牛肉膏2％，蛋白胨2％，酵母膏1％，，半胱氨酸鹽酸鹽0.05％，吐溫80為0.01％，醋酸鈉0.5％，硫酸錳0.02％，磷酸氫二鉀0.2％，其余為水；混合均勻后，在115℃的條件下滅菌12分鐘；

(3)、制備發酵乳：準備脫脂奶粉、葡萄糖和蒸餾水，并且質量比為10：2：88，首先混合，然后經過預熱、均質、殺菌、冷卻4個步驟后待用；

(4)、收獲菌體：采用鼠李糖乳桿菌、植物乳桿菌、副干酪乳桿菌、戊糖片球菌和乳酸片球菌混合益生菌，并按照比例1：1.5：1.2:1:2混合；37℃培養活化1～3次，在菌體對數生長末期收獲菌體；

(5)、接種：將步驟(4)收獲的菌體按照1.5×107CFU/mL接種于步驟(3)制備的發酵乳的培養基中，37℃培養活化若干次，當凝乳時間達到穩定后完成菌種活化；取活化后的混合菌種按照2.5％的接種量接種到發酵液中，保證過程無菌操作；

(6)、前發酵：以2.5％的接種量接種后，在36℃經過107小時發酵流程，低溫長時間發酵得到的營養物質最多，益生菌生長最良好，活力最高；中間要緩慢攪拌，保證不能染雜菌；前發酵完成后，pH值將降到5.9左右；