[發明專利]一種黃芪多糖脂質體的制備方法

在審

• 申請號: 201810604869.5
• 申請日: 2018-06-12
• 公開（公告）號: CN108653211A
• 公開（公告）日: 2018-10-16
• 發明（設計）人: 楊鴻;張勇軍;鄧樺;王少杰;巴娟;巫輔達
• 申請（專利權）人: 佛山科學技術學院
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K47/24;A61K47/28;A61K31/715;A61P37/04;A61P37/02;A61P31/12;A61P35/00;A61P39/06;A61P39/00
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 王國標

本發明公開了一種黃芪多糖脂質體的制備方法，其包括如下工藝步驟：1)將大豆卵磷脂和膽固醇按原料質量比為8:1共同溶于氯仿溶液中；2)將步驟1)所述混合液進行減壓旋轉蒸發處理，待形成一層薄膜后加入乙醚薄膜溶解；3)加入原料質量為膽固醇添加量一半的含有黃芪多糖的磷酸鹽緩沖溶液，超聲處理，再進行減壓旋轉蒸發至乙醚全部揮發，得黃芪多糖脂質體。本發明采用逆向蒸發法制備黃芪多糖脂質體，并通過調整其原料配比及工藝參數，使所得黃芪多糖脂質體懸液的包封率高達90％以上，且所制備得的黃芪多糖脂質體具有優異的穩定性和細胞穿透性，從而對提高生物利用率和降低黃芪多糖使用劑量具有重要的臨床意義，進而有效推動黃芪多糖新制劑的研發。

技術領域

本發明涉及化工醫藥領域，特別涉及一種脂質體的制備方法。

背景技術

黃芪多糖是豆科植物蒙古黃芪或膜莢黃芪的干燥根經提取、濃縮、純化而成的水溶性雜多糖。其呈淡黃色，粉末細膩，均勻無雜質，具引濕性。黃芪多糖由己糖醛酸、葡萄糖、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖醛酸和葡萄糖醛酸等組成，可作為免疫促進劑或調節劑，同時具有抗病毒、抗腫瘤、抗衰老、抗輻射、抗應激、抗氧化等作用。然而傳統的黃氏多糖制劑存在穩定性差、生物利用度低、易被降解及對細胞穿透力弱等缺點，其包封率普遍低于50％，且通過傳統的給藥方式進行給藥的療效并不好。現有技術中多通過對黃芪多糖改性以提高其生物活性從而更好地發揮其藥效，然而這些改性是針對黃芪多糖結構的，如硫酸化、羧甲基化、乙酰基化等，其工藝復雜，可控性差。因此如何提高黃芪多糖的生物利用度、穩定性和治療效果、降低使用劑量，對其黃芪多糖新制劑的研發具有重大意義。

發明內容

本發明的目的在于針對上述現有技術的不足，提供一種黃芪多糖脂質體的制備方法。

本發明所采取的技術方案是：一種黃芪多糖脂質體的制備方法，其包括如下工藝步驟：

1)將大豆卵磷脂和膽固醇按原料質量比為7:1～9:1共同溶于氯仿溶液中，得混合液；

2)將步驟1)所述混合液置于轉速為50～65r/min、溫度為37℃的條件下進行減壓旋轉蒸發處理，待形成一層薄膜后加入乙醚薄膜溶解；

3)加入原料質量為膽固醇添加量一半的含有黃芪多糖的磷酸鹽緩沖溶液，超聲混勻處理80～100s，再置于轉速為50～65r/min、溫度為37℃的條件下進行減壓旋轉蒸發至乙醚全部揮發，置于4℃保存，得黃芪多糖脂質體。

具體地，本發明中大豆卵磷脂和膽固醇的原料質量比對其最終黃芪多糖脂質體懸液的包封率有著重要影響，大豆卵磷脂和膽固醇的原料質量比多大或多小均會使得其包封率下降。而本發明中的膽固醇和含有黃芪多糖的磷酸鹽緩沖溶液的原料質量比對其黃芪多糖脂質體的形成效率有著重要影響，當所述磷酸鹽緩沖溶液的添加量為膽固醇的一半時，可使脂質體快速形成。

作為上述方案的進一步改進，所述磷酸鹽緩沖溶液的濃度為4.5～6mg/mL，其有利于提高黃芪多糖脂質體的包封率。

作為上述方案的進一步改進，所述磷酸鹽緩沖溶液的pH為7.4，其有利于提高體系的穩定性。

作為上述方案的進一步改進，所述含有黃芪多糖的磷酸鹽緩沖溶液中的黃芪多糖的純度≥80％，其有利于實現較高的生物利用率。

本發明采用如下方法對各項試樣的包封率進行測定：

A、校準曲線的制備：以葡聚糖標準品和蒽酮-濃硫酸顯色法建立黃芪多糖校準曲線，并采用蒽酮-濃硫酸顯色法測定樣品中各項指標的吸光度。根據建立的校準曲線回歸方程換算出所需各項指標的質量，從而計算出各測試樣的包封率。