[發明專利]一種用于檢測HBV-pgRNA的試劑盒

有效

• 申請號: 201810599643.0
• 申請日: 2018-06-12
• 公開（公告）號: CN108754022B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 劉淑園;陳華云;張天海;王盼盼
• 申請（專利權）人: 廣州和實生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/6844;C12N15/11;C12M1/34;C12M1/00
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 朱本利

1.一種用于檢測HBV－pgRNA的試劑盒，其中，所述試劑盒包括擴增試劑；所述擴增試劑原料包括：

HBV－pgRNA引物探針序列；

保護劑，其包括海藻糖、蔗糖和棉子糖；

靈敏度增強劑，其包括蘇氨酸、牛血清白蛋白和TrisX－100；

擴增酶系，其包括重組酶、輔助酶、單鍵結合蛋白、聚合酶和內切酶；

dNTPS；

所述試劑盒包括：

提取倉，其包括按照樣本流向依次分布的裂解機構、洗滌機構和洗脫機構；所述裂解機構包括按照樣本流向依次分布的磁性槽、裂解槽和結合槽；所述裂解機構內，相鄰兩槽之間設有可活動的隔斷；所述裂解機構內設有裂解試劑和磁性物質；所述洗滌機構包括第一油槽和洗滌槽，所述洗滌槽內設有洗滌液；所述結合槽與所述第一油槽之間設有可活動的隔斷；所述第一油槽位于所述裂解機構和所述洗滌槽之間；所述洗脫機構包括第二油槽和洗脫槽，所述洗脫槽內設有洗脫液；所述第二油槽位于所述洗滌槽和所述洗脫槽之間；所述第一油槽和所述第二油槽內均設有油相；相鄰兩槽之間設有可活動的隔斷；所述裂解機構與所述第一油槽之間設有可活動的隔斷；所述提取倉進一步包括緩沖液槽，所述緩沖液槽位于所述洗脫槽下游，且與所述洗脫槽之間設有可活動的隔斷；所述第一油槽和所述洗滌槽之間設有可上下移動的密封片；所述第二油槽和所述洗脫槽之間設有可上下移動的密封片；所述裂解機構內，相鄰兩槽之間設有可脫落的固定卡片；所述結合槽與所述第一油槽之間設有可脫落的固定卡片；所述洗滌槽和所述第二油槽之間設有可脫落的固定卡片；所述洗脫槽與所述緩沖液槽之間設有可脫落的固定卡片；所述提取倉進一步包括彈性密封膜，所述彈性密封膜位于所述密封片與所述固定卡片下方，且被所述密封片與所述固定卡片壓緊；

驅動機構，其包括可按照樣本流向滑移的滑塊；所述滑塊上設有磁鐵；所述滑塊上設有用于頂起所述密封片或使所述固定卡片脫落的楔形塊；

擴增管，其位于所述洗脫機構下游；所述擴增管與所述洗脫槽連通；所述緩沖液槽位于所述擴增管上游，且與所述擴增管相通。

2.如權利要求1所述的試劑盒，其中，所述擴增試劑原料進一步包括反應平臺，所述反應平臺包括緩沖系統和供能系統；所述緩沖系統包括Tris－SO₄(PH8.0)、KCl和MgCl₂；所述供能系統包括ATP、磷酸肌酸和肌酸激酶。

3.如權利要求2所述的試劑盒，其中，所述擴增試劑原料進一步包括聚乙二醇。

4.如權利要求3所述的試劑盒，其中，所述擴增試劑原料通過凍干工藝處理，得到所述擴增試劑：所述凍干工藝包括：

步驟S1：將所述擴增試劑原料在－55℃環境下放置6h；

步驟S2：將所述擴增試劑原料在－35℃環境下放置12h；

步驟S3：將所述擴增試劑原料在－25℃環境下放置4h；

步驟S4：將所述擴增試劑原料在20℃環境下放置6h。

5.如權利要求1所述的試劑盒，其中，所述裂解機構進一步包括位于所述磁性槽上游的樣本槽，樣本位于所述樣本槽中；所述裂解試劑包括裂解增強劑和裂解結合液，分別設于所述裂解槽和所述結合槽內；所述磁性物質設于所述磁性槽內。