[發明專利]一種熱穩定性改良的低溫外切菊粉酶突變體Mut8S有效
| 申請號： | 201810597684.6 | 申請日： | 2018-06-11 |
| 公開（公告）號： | CN108504644B | 公開（公告）日： | 2019-06-28 |
| 發明（設計）人： | 周峻沛;黃遵錫;張蕊;何麗梅;韓楠玉;丁俊美;許波;唐湘華 | 申請（專利權）人： | 云南師范大學 |
| 主分類號： | C12N9/24 | 分類號： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艷 |
| 地址： | 650500 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 突變體 外切菊粉酶 熱穩定性 改良 酶活 氨基酸序列 蛋白質改造 基因工程 生物能源 可水解 最適pH 果糖 菊粉 釀酒 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種熱穩定性改良的低溫外切菊粉酶突變體Mut8S，其特征在于，所述的突變體Mut8S的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.權利要求1所述的突變體Mut8S的編碼基因，其特征在于，所述的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.包含權利要求2所述的編碼基因的重組載體。
4.包含權利要求2所述的編碼基因的重組菌。
5.權利要求1所述的熱穩定性改良的低溫外切菊粉酶突變體Mut8S的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)在Mut8S編碼基因的5'端補加HRV3C蛋白酶酶切位點編碼序列；
2)將1)中的序列與表達載體pET-28a(+)相連接，并將連接產物轉化大腸桿菌BL21(DE3)，獲得包含Mut8S編碼基因的重組菌株；
3)培養重組菌株，誘導重組外切菊粉酶突變體Mut8S表達；
4)回收并純化所表達的重組外切菊粉酶突變體Mut8S；
5)用HRV3C蛋白酶酶切重組外切菊粉酶突變體Mut8S；
6)回收并純化外切菊粉酶突變體Mut8S；
7)活性測定。
6.權利要求1所述的突變體Mut8S在食品或釀酒制備中的應用。
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