[發(fā)明專利]一種多菌混合發(fā)酵制取乙醇方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201810589834.9 | 申請日： | 2018-06-08 |
| 公開（公告）號： | CN108728499A | 公開（公告）日： | 2018-11-02 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 張?zhí)?/a>;黃晶;曹青;肖建勛;康宇;孟凡欽;江佳璐;徐菲 | 申請（專利權(quán)）人： | 武漢理工大學(xué) |
| 主分類號： | C12P7/08 | 分類號： | C12P7/08;C12R1/145 |
| 代理公司： | 北京盛凡智榮知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11616 | 代理人： | 戴翔 |
| 地址： | 430000 湖*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 接種 混合發(fā)酵 接種量 新鮮培養(yǎng)基 試管 乙醇 菌株 制取 發(fā)酵 培養(yǎng)基溶液 保藏 傳代培養(yǎng) 發(fā)酵工藝 發(fā)酵周期 工業(yè)廢氣 有效降解 毒物 傳統(tǒng)的 發(fā)酵罐 培養(yǎng)瓶 活化 降解 菌液 微生物 改造 | ||
1.一種多菌混合發(fā)酵制取乙醇方法，其特征在于：包括以下步驟；
(1)保藏菌株的活化：將兩種菌株C.ljungdahlii與C.ragsdalei分別接種至裝有培養(yǎng)基溶液的試管中，在37℃恒溫?fù)u床中培養(yǎng)24h；
(2)傳代培養(yǎng)：將C.ljungdahlii以及C.ragsdalei菌液按10％的接種量接種至含新鮮培養(yǎng)基試管中，所述的兩種試管要求在37℃恒溫?fù)u床培養(yǎng)48h；連續(xù)多次傳代培養(yǎng)至獲取穩(wěn)定性狀菌株；
(3)擴(kuò)大化培養(yǎng)獲取種子：按各接種量(C.ljungdahlii 10％，C.ragsdalei 10％)接種兩種菌株于125ml容量培養(yǎng)瓶中，混合后于37℃恒溫?fù)u床培養(yǎng)，獲取足量菌液；
(4)發(fā)酵罐混合發(fā)酵：將新鮮培養(yǎng)基加入發(fā)酵罐中，按10％的接種量接種至發(fā)酵罐中，連續(xù)通入工業(yè)廢氣，37℃恒溫攪拌培養(yǎng)；
(5)取樣檢測：每天2次對發(fā)酵液進(jìn)行氣相色譜檢測，定量分析乙醇產(chǎn)量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種多菌混合發(fā)酵制取乙醇方法，其特征在于：培養(yǎng)基的內(nèi)包括由以下組成；2(N-morpholino)ethanesulfonic acid(MES)20.0g、Yeast extract0.5g、Mineral solution25.0ml、Trace element solution10.0ml、Vitamin solution10.0ml以及Milli-Q930.0ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種多菌混合發(fā)酵制取乙醇方法，其特征在于：所述的培養(yǎng)液為培養(yǎng)基的混合并且恒溫振蕩培養(yǎng)箱內(nèi)搖床轉(zhuǎn)速：200rpm，溫度控制在37℃，PH＝5.9以及填充設(shè)有CO、CO2和H2的混合氣環(huán)境內(nèi)取得，所述試管內(nèi)的培養(yǎng)基體積為9.3ml、培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基體積為93ml以及發(fā)酵罐中培養(yǎng)基體積為3L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種多菌混合發(fā)酵制取乙醇方法，其特征在于：所述步驟內(nèi)還設(shè)有菌株C.autoethanogenum，所述的C.autoethanogenum按照步驟并且與C.autoethanogenum，C.ljungdahlii以及C.ragsdalei制配接種量比例為2：1：1，按10％接種量接種于新鮮培養(yǎng)基中，通入氣體(CO 50％，H2 5％，CO2 45％)，37℃恒溫攪拌培養(yǎng)，發(fā)酵罐中發(fā)酵3天，發(fā)酵結(jié)束后收集發(fā)酵后產(chǎn)物。
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