[發明專利]一種抑制氨氣排放的高效堆肥復合菌種的制備方法及使用方法

有效

• 申請號: 201810588269.4
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108795806B
• 公開（公告）日: 2021-09-10
• 發明（設計）人: 杜京京;馬闖;張珂;張玉燕;屈明祥;扈斌;張宏忠;魏明寶;劉楠;金寶丹
• 申請（專利權）人: 鄭州輕工業學院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F15/00;C05F17/20;C05F17/50;C12R1/20;C12R1/01
• 代理公司: 北京思海天達知識產權代理有限公司 11203
• 代理人: 劉萍

1.一種抑制氨氣排放的高效堆肥復合菌種的制備方法，其特征在于：采用除氨菌種叢毛單胞菌（Comamonas sp.）ACCC 02484、黃桿菌（Flavobacterium sp.）ACCC 19708、魯氏不動桿菌（Acinetobacter lwoffii）ACCC01091和寡養單胞菌（Stenotrophomonas nitritireducens）ACCC 10184結合制備成復合菌種，將這4個菌種按照1:1:2:2的體積比例配置成復合菌種，將復合菌種、菌種活化劑和發酵物料按體積比為1:50:2混合并充分攪拌8小時制成活化復合菌種，其中發酵物料為松木鋸末與脫水城市生活污水污泥按體積1:4均勻混合；將活化復合菌種與發酵物料按3:2000的體積比例均勻接種到發酵罐中進行好氧發酵10-12天；

菌種活化劑的制備具體為：

取 6g 纖維素、2g 淀粉、2g 麥麩、3g 牛肉膏、2g 蛋白胨、3g 葡萄糖、900 mL土壤浸提液、5g NaCl、2.5g KH₂PO₄、100mL pH 值為 7.2 的 H₂O 制成菌種活化劑，待用。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，其中復合菌種的制備具體為：

1）、培養基的制備與滅菌

營養肉汁培養基：牛肉膏 0.3g，蛋白胨 1.0g，NaCl 0.5g，水 100ml，pH 7；LB培養基；將以上兩種培養基在121℃下滅菌20min，待用；

2）、菌種的擴大培養

將叢毛單胞菌和黃桿菌在LB培養基中振蕩培養，將魯氏不動桿菌、和寡養單胞菌在營養肉汁培養基中振蕩培養；

3）、復合菌種的制備

當這四個菌種的菌液達到對數期時停止培養，并將這四種菌液調到相同濃度后，按體積比1:1:2:2進行配置，制得復合菌種。

3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，纖維素采用羧甲基纖維素納。

4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，土壤浸提液的制備具體如下：

取土200g置于燒杯或三角瓶中，加入蒸餾水1000毫升，瓶口用透氣塞封口，在水浴中沸水加熱3小時，冷卻，沉淀24小時，此過程連續進行 3次以上，然后過濾，取上清液，于高壓滅菌鍋中滅菌后即制得土壤浸出液，于4℃冰箱中保存，備用。

5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，發酵物料的制備具體如下：以松木鋸末為調理劑，與城市生活污水處理廠污泥按體積比為1：4混合制成發酵物料，其中污泥是脫水的生活污水污泥，含水率為75-83%，pH為6-8，發酵物料有機質含量為50-60%，全氮占干重比例為1-3%，全碳占干重比例為35-50%。