[發明專利]一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應用

有效

• 申請號: 201810587697.5
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108444978B
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發明（設計）人: 蔡稱心;胡耀娟;劉曉燕;吳萍
• 申請（專利權）人: 南京師范大學
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;G01N1/28
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 孫斌

本發明公開了一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應用，該方法包括(1)配制枝狀金納米結構溶液；(2)配制血紅素溶液；(3)制備標準樣品；(4)建立枝狀金納米結構檢測血紅素濃度的標準曲線；(5)檢測待測樣品中血紅素的濃度。本發明基于枝狀金納米結構對血紅素的表面增強拉曼作用，將枝狀金納米結構首次應用于血紅素的測定，通過表面增強拉曼光譜分析方法實現了血紅素高效、快速的檢測。該方法操作簡便，檢測靈敏度高，檢測限低，穩定性好。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及一種血紅素的檢測方法，特別是涉及一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應用。

背景技術

血紅素是重要的天然金屬卟啉配合物，是生物體中血紅蛋白和肌紅蛋白等的活性中心，并且作為一種天然色素、鐵強化劑和抗貧血藥，具有重要的生理作用和很高的實用價值，被廣泛地應用在食品工業、醫藥保健領域，是目前公認的吸收率最高、效果最好的生物鐵劑。

在常規的血液檢測中，除了檢測血糖和膽固醇之外，血紅素也是一項重要的生化檢測標準，并且在血紅素的工業化生產中也需要檢測其含量來控制產品質量，因而研究者們也越來越重視血紅素的檢測。目前，檢測血紅素的方法主要有比色法、紫外分光光度法、電化學方法以及HPLC法等。但這些方法具有操作步驟復雜、操作誤差較大、測定結果準確度低等問題。

發明內容

發明目的：針對現有技術存在的問題，本發明提供一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法，該方法將枝狀金納米結構應用于血紅素的檢測，建立一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼作用的血紅素檢測的新方法，所述方法能夠快速、有效的檢測血紅素，并且具有靈敏度高、操作簡單、成本低廉等優點。

本發明還提供一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法的應用。

技術方案：為了實現是上述目的，如本發明所述一種基于枝狀金納米結構表面增強拉曼光譜的血紅素的檢測方法，包括以下步驟：

(1)配制枝狀金納米結構溶液：將金納米結構分散在乙醇溶液中，得到金納米結構分散液A；

(2)配制血紅素溶液：將血紅素溶解在二甲基亞砜中，并用稀釋，得到不同濃度的血紅素溶液B；

(3)制備標準樣品：將金納米結構分散液A和血紅素母液B混合攪拌，然后離心分離，移去上清液，將下層沉淀物分散到乙醇溶液中，取分散液晾干，得到含有不同濃度血紅素的標準樣品；

(4)建立枝狀金納米結構檢測血紅素的標準曲線：通過拉曼光譜儀檢測步驟(3)所制備的標準樣品的拉曼光譜，并記錄其拉曼光譜特征峰信號I；最后將所得到的I與步驟(3)所得不同濃度的標準樣品的血紅素濃度的自然數對數值繪制成I-ln c標準曲線，采用線性回歸法得到I-ln c線性回歸方程，建立基于枝狀金納米結構的表面增強拉曼作用的血紅素檢測方法；

(5)檢測待測樣品中血紅素的濃度：將待測樣品與步驟(1)中配制的金納米結構溶液混合攪拌，然后離心分離，移去上清液，將下層沉淀物分散到乙醇溶液中，取分散液晾干，按照與步驟(4)相同的方法檢測其拉曼光譜，根據拉曼光譜特征峰的強度I，由步驟4)中得到的標準曲線，計算出待測樣品中血紅素的含量。

其中，步驟(1)所述金納米結構為枝狀，其粒徑大小為50～60nm。可以采用現有技術中已知的方法合成。有關枝狀金納米粒子的合成，可參見文獻(Kumar,P.S.；Pastoriza-Santos,I.；Rodríguez-González,B.；García de Abajo,F.J.；Liz-Marzán L.M.；High-yield synthesis and optical response of gold nanostars,Nanotechnology,2008,19,015606(6pp)。