[發(fā)明專利]一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201810587697.5
• 申請(qǐng)日: 2018-06-08
• 公開（公告）號(hào): CN108444978B
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 蔡稱心;胡耀娟;劉曉燕;吳萍
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 南京師范大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/65
• 分類號(hào): G01N21/65;G01N1/28
• 代理公司: 南京蘇高專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32204
• 代理人: 孫斌

本發(fā)明公開了一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應(yīng)用，該方法包括(1)配制枝狀金納米結(jié)構(gòu)溶液；(2)配制血紅素溶液；(3)制備標(biāo)準(zhǔn)樣品；(4)建立枝狀金納米結(jié)構(gòu)檢測血紅素濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線；(5)檢測待測樣品中血紅素的濃度。本發(fā)明基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)對(duì)血紅素的表面增強(qiáng)拉曼作用，將枝狀金納米結(jié)構(gòu)首次應(yīng)用于血紅素的測定，通過表面增強(qiáng)拉曼光譜分析方法實(shí)現(xiàn)了血紅素高效、快速的檢測。該方法操作簡便，檢測靈敏度高，檢測限低，穩(wěn)定性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種血紅素的檢測方法，特別是涉及一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

血紅素是重要的天然金屬卟啉配合物，是生物體中血紅蛋白和肌紅蛋白等的活性中心，并且作為一種天然色素、鐵強(qiáng)化劑和抗貧血藥，具有重要的生理作用和很高的實(shí)用價(jià)值，被廣泛地應(yīng)用在食品工業(yè)、醫(yī)藥保健領(lǐng)域，是目前公認(rèn)的吸收率最高、效果最好的生物鐵劑。

在常規(guī)的血液檢測中，除了檢測血糖和膽固醇之外，血紅素也是一項(xiàng)重要的生化檢測標(biāo)準(zhǔn)，并且在血紅素的工業(yè)化生產(chǎn)中也需要檢測其含量來控制產(chǎn)品質(zhì)量，因而研究者們也越來越重視血紅素的檢測。目前，檢測血紅素的方法主要有比色法、紫外分光光度法、電化學(xué)方法以及HPLC法等。但這些方法具有操作步驟復(fù)雜、操作誤差較大、測定結(jié)果準(zhǔn)確度低等問題。

發(fā)明內(nèi)容

發(fā)明目的：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，本發(fā)明提供一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法，該方法將枝狀金納米結(jié)構(gòu)應(yīng)用于血紅素的檢測，建立一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼作用的血紅素檢測的新方法，所述方法能夠快速、有效的檢測血紅素，并且具有靈敏度高、操作簡單、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)。

本發(fā)明還提供一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法的應(yīng)用。

技術(shù)方案：為了實(shí)現(xiàn)是上述目的，如本發(fā)明所述一種基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)表面增強(qiáng)拉曼光譜的血紅素的檢測方法，包括以下步驟：

(1)配制枝狀金納米結(jié)構(gòu)溶液：將金納米結(jié)構(gòu)分散在乙醇溶液中，得到金納米結(jié)構(gòu)分散液A；

(2)配制血紅素溶液：將血紅素溶解在二甲基亞砜中，并用稀釋，得到不同濃度的血紅素溶液B；

(3)制備標(biāo)準(zhǔn)樣品：將金納米結(jié)構(gòu)分散液A和血紅素母液B混合攪拌，然后離心分離，移去上清液，將下層沉淀物分散到乙醇溶液中，取分散液晾干，得到含有不同濃度血紅素的標(biāo)準(zhǔn)樣品；

(4)建立枝狀金納米結(jié)構(gòu)檢測血紅素的標(biāo)準(zhǔn)曲線：通過拉曼光譜儀檢測步驟(3)所制備的標(biāo)準(zhǔn)樣品的拉曼光譜，并記錄其拉曼光譜特征峰信號(hào)I；最后將所得到的I與步驟(3)所得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品的血紅素濃度的自然數(shù)對(duì)數(shù)值繪制成I-ln c標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用線性回歸法得到I-ln c線性回歸方程，建立基于枝狀金納米結(jié)構(gòu)的表面增強(qiáng)拉曼作用的血紅素檢測方法；

(5)檢測待測樣品中血紅素的濃度：將待測樣品與步驟(1)中配制的金納米結(jié)構(gòu)溶液混合攪拌，然后離心分離，移去上清液，將下層沉淀物分散到乙醇溶液中，取分散液晾干，按照與步驟(4)相同的方法檢測其拉曼光譜，根據(jù)拉曼光譜特征峰的強(qiáng)度I，由步驟4)中得到的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算出待測樣品中血紅素的含量。

其中，步驟(1)所述金納米結(jié)構(gòu)為枝狀，其粒徑大小為50～60nm。可以采用現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法合成。有關(guān)枝狀金納米粒子的合成，可參見文獻(xiàn)(Kumar,P.S.；Pastoriza-Santos,I.；Rodríguez-González,B.；García de Abajo,F.J.；Liz-Marzán L.M.；High-yield synthesis and optical response of gold nanostars,Nanotechnology,2008,19,015606(6pp)。