[發明專利]一種腫瘤細胞靶向特異性熒光探針及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201810586518.6
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108815537A
• 公開（公告）日: 2018-11-16
• 發明（設計）人: 孫春麗;夏帆;程勇;婁筱叮
• 申請（專利權）人: 華中科技大學
• 主分類號: A61K49/00
• 分類號: A61K49/00;A61K47/42;G01N21/64
• 代理公司: 華中科技大學專利中心 42201
• 代理人: 曹葆青;李智

1.一種腫瘤細胞靶向特異性熒光探針，其特征在于，該熒光探針含有多肽復合物和熒光分子相連接構成的部分；所述多肽復合物由靶向多肽、穿膜肽、含有鍵合基團的肽和核定位肽按任意順序連接而成；所述多肽復合物通過所述鍵合基團與所述熒光分子共價連接；所述熒光分子為聚集誘導發光化合物。

2.如權利要求1所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針，其特征在于，所述熒光分子為含有疊氮基團的聚集誘導發光化合物；所述鍵合基團為炔基；所述靶向多肽為氨基肽酶CD13的配體和整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體中的至少一種；所述氨基肽酶CD13的配體的氨基酸序列為SEQ ID No.1；所述整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體的氨基酸序列為RGD；所述穿膜肽的氨基酸序列為SEQ ID No.2；所述核定位肽的氨基酸序列為SEQ ID No.3。

3.如權利要求2所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針，其特征在于，所述氨基肽酶CD13的配體、穿膜肽、含有鍵合基團的肽、核定位肽和整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體依次連接。

4.如權利要求1所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針，其特征在于，所述熒光分子為1-(4-疊氮丁基)-4-(2-四苯乙烯乙烯基)-吡啶，結構式如式I所示；

5.如權利要求1所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針，其特征在于，所述含有鍵合基團的肽為含有丙炔基的三聚甘氨酸。

6.一種腫瘤細胞靶向特異性熒光探針的制備方法，其特征在于，包含以下步驟：

(1)將多肽復合物和點擊反應催化劑溶解后，得到混合溶液；

(2)向步驟(1)得到的混合溶液中加入含有疊氮基團的聚集誘導發光化合物，在惰性氣體保護下，25℃-45℃下攪拌反應12h-48h；使所述聚集誘導發光化合物上的疊氮基團與所述多肽復合物上的炔基發生點擊反應，生成腫瘤細胞靶向特異性熒光探針；所述多肽復合物由靶向多肽、穿膜肽、含有炔基基團的肽和核定位肽按任意順序連接而成。

7.如權利要求6所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針的制備方法，其特征在于，所述聚集誘導發光化合物為1-(4-疊氮丁基)-4-(2-四苯乙烯乙烯基)-吡啶，結構式如式I所示；

8.如權利要求6所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針的制備方法，其特征在于，步驟(1)所述的催化劑為亞銅離子；所述亞銅離子的濃度為0.1μM-0.3μM；步驟(1)所述的多肽復合物的濃度為0.5μM-1μM；步驟(2)所述含有疊氮基團的聚集誘導發光化合物的濃度為2μM-3μM。

9.如權利要求6所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針的制備方法，其特征在于，所述含有炔基基團的肽為含有丙炔基的三聚甘氨酸；所述靶向多肽為氨基肽酶CD13的配體和整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體中的至少一種；所述氨基肽酶CD13的配體的氨基酸序列為SEQ ID No.1，所述氨基肽酶CD13的配體用于靶向新生的血管內皮細胞或癌細胞表面表達的氨基肽酶CD13蛋白；所述整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體的氨基酸序列為RGD，所述整合素蛋白α_Ⅴβ₃的配體用于靶向癌細胞表面表達的整合素蛋白α_Ⅴβ₃；所述穿膜肽的氨基酸序列為SEQ ID No.2；所述核定位肽的氨基酸序列為SEQ ID No.3。

10.如權利要求1-5所述的腫瘤細胞靶向特異性熒光探針在制備腫瘤細胞靶向熒光成像試劑、腫瘤細胞示蹤試劑、腫瘤細胞核成像試劑或藥物載體方面的應用。