[發(fā)明專利]一種促進馬鈴薯幼苗壯根的植物組織培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810584849.6
• 申請日: 2018-06-06
• 公開（公告）號: CN108552059B
• 公開（公告）日: 2020-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳道甫;林心靈;楊輝艷;馬星;何子元
• 申請（專利權(quán)）人: 武漢葉動力生物科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 42242 武漢藍寶石專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 廉海濤

本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體地說是涉及一種促進馬鈴薯幼苗壯根的組織培養(yǎng)方法。本發(fā)明的組織培養(yǎng)方法包括以下步驟：(1)材料采集與消毒；(2)莖尖剝離：在雙目解剖鏡下，將消毒后的馬鈴薯頂芽剝?nèi)ネ鈱尤~片，僅留1?2個葉原基；(3)初代培養(yǎng)：將5?6個大小為0.1?0.2mm的莖尖接種在初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；(4)生根培養(yǎng)：將步驟(3)中無菌苗按單株接種于生根培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，即得脫毒試管苗；本發(fā)明的組織培養(yǎng)方法利用莖尖離體培養(yǎng)，克服了種薯用量大的問題；且本發(fā)明優(yōu)化了初代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件，既能使馬鈴薯生根多、生根快，還能使馬鈴薯組培苗健壯，更易移栽成活。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體地說是涉及一種促進馬鈴薯幼苗壯根的植物組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

植物組織培養(yǎng)技術(shù)是20世紀初發(fā)展起來的技術(shù)，是指在無菌條件下，將離體的植物器官、組織、細胞、原生質(zhì)體等在合適的條件進行離體培養(yǎng)，誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織、不定芽等，之后形成完整植株的過程。組織培養(yǎng)技術(shù)因其具有可以利用各種人工培養(yǎng)條件控制細胞的生長、分化等優(yōu)點，有力地推動了植物生理學(xué)、病理學(xué)、藥學(xué)、遺傳學(xué)、育種以及生物化學(xué)等學(xué)科的交叉發(fā)展，并廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、林業(yè)、園藝、工業(yè)、醫(yī)藥業(yè)等多種行業(yè)，產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟效益和社會效益，歸納起來，有以下幾個方面：1、苗木的離體快繁；2、培育脫毒苗；3、應(yīng)用于植物育種如單倍體育種、原生質(zhì)體融合、胚和胚乳的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)基因育種等；4、生產(chǎn)次生代謝產(chǎn)物如中藥成分等；5、人工種子和種質(zhì)保存；6、基因功能研究等。

馬鈴薯是一種分布廣泛，適應(yīng)性強、產(chǎn)量高、營養(yǎng)豐富的宜糧、宜菜、宜飼、宜做工業(yè)原料的高產(chǎn)經(jīng)濟作物，也是世界十大營養(yǎng)食品之一。馬鈴薯中含有蛋白質(zhì)、碳水化合物、脂肪、鈣、磷、鋅、鐵、硫胺素、核苷酸、維生素等。而且其含有豐富的氨基酸，備受當代營養(yǎng)食品發(fā)展的重視。此外，馬鈴薯還含有碳水化合物、脂肪、糖類、粗纖維、灰分和各種維生素等營養(yǎng)素，這些營養(yǎng)素對人體是不可缺少的物質(zhì)。目前以馬鈴薯葉片、莖段、葉柄、根等多種外植體進行的再生植株培養(yǎng)，均采用多步成苗培養(yǎng)。而現(xiàn)在馬鈴薯的大田栽培主要是采用塊莖繁殖，塊莖繁殖有著諸多優(yōu)勢，但也存在明顯的弊端，即種薯用量大、繁殖系數(shù)低和病毒易積累，導(dǎo)致了嚴重的品質(zhì)退化。

而且組織培養(yǎng)所獲得的試管苗往往長勢較弱，根系不發(fā)達，移栽后成活率低，嚴重影響試管苗的培養(yǎng)效率和進一步的應(yīng)用效果。因此，建立一種促進馬鈴薯細苗壯根的組織培養(yǎng)方法，就顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題，本發(fā)明提出了一種促進馬鈴薯幼苗壯根的組織培養(yǎng)方法，該方法以莖尖離體培養(yǎng)，克服了種薯用量大的問題；且本發(fā)明優(yōu)化了初代培養(yǎng)和生根培養(yǎng)的培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件，既能使馬鈴薯生根多、生根快，還能使馬鈴薯組培苗健壯，更易移栽成活。

本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的：

一種促進馬鈴薯幼苗壯根的植物組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

(1)材料采集與消毒：于6月份剪取田間生長旺盛的馬鈴薯苗頂芽，切去葉片，自來水沖洗40-50min，用無菌濾紙吸干水分，置于超凈工作臺上用75％酒精浸洗25s，再用0.1％升汞消毒3-6min，最后用無菌水沖洗7-8次，備用；

(2)莖尖剝離：在雙目解剖鏡下，將消毒后的馬鈴薯頂芽剝?nèi)ネ鈱尤~片，僅留1-2個葉原基；

(3)初代培養(yǎng)：將5-6個大小為0.1-0.2mm的莖尖接種在初代培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)；所述初代培養(yǎng)基組成為：在1/2MS培養(yǎng)基中添加6-BA、ZT、乙烯利和烯效唑，所述6-BA的終濃度為1.2-2.5mg/L，ZT的終濃度為0.08-0.18mg/L，乙烯利的終濃度為0.2-0.4mg/L，烯效唑的終濃度為0.1-0.2mg/L；