[發明專利]一種用于等離子體金芯片的封閉緩沖液

在審

• 申請號: 201810584225.4
• 申請日: 2018-06-08
• 公開（公告）號: CN108896752A
• 公開（公告）日: 2018-11-27
• 發明（設計）人: 廖滔;王國新;唐梅杰;陳敏文
• 申請（專利權）人: 深圳清華大學研究院
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53
• 代理公司: 廣東廣和律師事務所 44298
• 代理人: 王少強

本發明提供一種用于等離子體金芯片的封閉緩沖液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、甘氨酸、檸檬酸鈉以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清白蛋白濃度為5?30g/L、所述海藻糖濃度為10?100g/L、所述甘氨酸濃度為5?30g/L、所述檸檬酸鈉濃度為0.02?0.2mol/L、所述Proclin300濃度為0.01?0.2％；且所述混合液pH值范圍為6.0?7.2，本申請可以長時間保持被固定蛋白的生物活性，進一步提高蛋白芯片穩定性，由于混合液的pH值為6.0?7.2，由此，本申請可以進一步在較長時間內保持被固定蛋白的生物活性。

[技術領域]

本發明涉及生物技術領域，尤其涉及一種能延長芯片表面蛋白的保存時間，提高蛋白芯片的穩定性的用于等離子體金芯片的封閉緩沖液。

[背景技術]

目前，臨床領域應用的免疫檢測方主要有免疫比濁、免疫層析、酶聯免疫(Elisa)、化學發光免疫分析(CLIA)，以及近些年發展應用的蛋白芯片-免疫熒光法。蛋白芯片在醫療診斷領域，通過雙抗夾心法來達到對疾病相關蛋白含量檢測的目的，利用連接于固相載體上的抗體和熒光標記的抗體分別與待測樣本中被檢測抗原分子上兩個抗原決簇結合，形成抗體-抗原-熒光染料標記的抗體復合物由于反應系統中固相抗體與標記抗體相對待測抗原過量，所以在監測范圍內，復合物的量與待測抗原成正比，通過測定復合物中熒光的信號值，即可測定抗原含量。由于微量生物活性物質(如抗原或抗體)固定到芯片上后很容易喪失活性，蛋白芯片法都涉及到一項關鍵的技術，即保持蛋白芯片的穩定性。

等離子體材料通常指的是貴金屬(例如金)及其復合物，其在特定波長范圍內的光照下具有獨特的表面等離子體共振效應。因為具有特定的結構和表面化學性質，這種等離子體材料在近紅外區(NIR-FE，650-1700nm)具有熒光增強效應，通過微量點樣技術在這種材料上固定特定的蛋白(抗體或抗原)，可實現生物標志物的檢測。值得注意的是，目前常用的等離子體金芯片芯片封閉緩沖液是磷酸鹽緩沖液，這類緩沖液只能對芯片上的蛋白質起保濕作用，短時間內防止因過度干燥而引起的蛋白質失活，并不能長期有效地保持其生物活性。保持芯片上蛋白質活性的方法通常是將芯片長期保存在-20℃以下的環境中，并且不能凍融，而在2-8℃冰箱存放一周或37℃破壞一天，其生物活性就損失了50％以上。可見，相關技術中存在蛋白質在芯片上易失活、穩定性差的問題。

[發明內容]

為克服現有技術所存在的問題，本發明提供一種能延長芯片表面蛋白的保存時間，提高蛋白芯片的穩定性的用于等離子體金芯片的封閉緩沖液。

本發明解決技術問題的方案是提供一種用于等離子體金芯片的封閉緩沖液，包括由牛血清白蛋白、海藻糖、甘氨酸、檸檬酸鈉以及Proclin300所混合而成的混合液；在所述混合液中所述牛血清白蛋白濃度為5-30g/L、所述海藻糖濃度為10-100g/L、所述甘氨酸濃度為5-30g/L、所述檸檬酸鈉濃度為0.02-0.2mol/L、所述Proclin300濃度為0.01-0.2％；且所述混合液pH值范圍為6.0-7.2。

優選地，所述牛血清白蛋白濃度為5-15g/L。

優選地，所述海藻糖濃度為20-50g/L。

優選地，所述甘氨酸濃度為10-20g/L。

優選地，所述檸檬酸鈉濃度為0.05-0.2mol/L。

優選地，所述Proclin300濃度為0.05-0.15％，更優選為0.1-0.15％。

優選地，所述牛血清白蛋白濃度為10-15g/L。

優選地，所述海藻糖濃度為30-50g/L。

優選地，所述甘氨酸濃度為10-15g/L。

優選地，所述檸檬酸鈉濃度為0.05-0.1mol/L。