[發明專利]硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料及制備方法、Lp-PLA2檢測試劑及制備方法

在審

• 申請號: 201810582766.3
• 申請日: 2018-06-07
• 公開（公告）號: CN108587626A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 郭棟才;杜紅麗;閻宇
• 申請（專利權）人: 湖南大學
• 主分類號: C09K11/85
• 分類號: C09K11/85;C09K11/02;G01N33/533
• 代理公司: 常州智慧騰達專利代理事務所(普通合伙) 32328
• 代理人: 曹軍

本發明涉及Lp?PLA2的檢測技術領域，具體涉及硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料及制備方法、Lp?PLA2檢測試劑及制備方法。本發明的硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料的制備方法，包括以下步驟：將NaY_xF₄:Yb_y/Tm_z@NaY_xF₄:Yb_y/Tm_z的氯仿分散液與十六烷基三甲基溴化銨溶液混合，之后離心分離得復合沉淀，將所述復合沉淀與乙醇、水在pH為8～9條件下反應20～40min，然后升溫至60～80℃，加入正硅酸四乙酯反應1～3h，之后與氨丙基三乙氧基硅烷繼續反應1～3h即得。該材料可標記Lp?PLA2抗體用以定性檢測脂蛋白磷脂酶A2。

技術領域

本發明涉及Lp-PLA2的檢測技術領域，具體涉及硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料及制備方法、Lp-PLA2檢測試劑及制備方法。

背景技術

大部分心腦血管患者存在一個或多個危險因子，傳統危險因子并不能解釋所有的冠狀動脈事件，這促使人們去尋找新的致病因子。炎癥已經被公認是動脈粥樣硬化炎癥標記物(AS)發生發展過程中的核心因素，多種炎癥因子參與其中導致斑塊的形成、進展和最終破裂。CRP和脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)是近年來引起廣泛關注與AS密切相關的新炎癥標記物，而Lp-PLA2的檢測能直接準確的反映血管內炎癥的程度，并且可作為一個動態指標。Lp-PLA2是血管特異性的炎癥因子，又稱血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)，分子量為45400，由成熟的巨噬細胞和淋巴細胞合成和分泌，并受炎性介質的調節，70％與低密度脂蛋白(LDL)結合，能水解低密度脂蛋白上的氧化卵磷脂，生成促炎物質—溶血卵磷脂(LPC)、氧化游離脂肪酸(ox-NEFA)，因此具有很強的促炎癥和促動脈粥樣硬化的作用。Lp-PLA2是獨立的心腦血管疾病風險預測指標，不受其他生物指標的影響，也為炎癥、動脈粥樣硬化與心腦血管疾病之間的聯系提供了新的佐證。

熒光標記在生物制藥和臨床診斷領域占據重要地位，好的標記抗體可起到猶如導彈的作用，使藥物達到靶向治療的特異效果；能使臨床診斷檢驗中得出準確、可靠的結果。對抗體進行熒光標記是抗體修飾中的一項高難技術，它不但需要合理成熟的操作流程，更需要質量優異的化學標記材料。基于稀土摻雜的熒光納米材料，主要包括上轉換熒光納米材料和長余輝熒光納米材料，上轉換發光是一種非線性過程，是指材料吸收兩個或多個低能量的光子而發出高能量光子的過程。長余輝發光是指材料在激發停止后，發光仍能持續一段時間。兩種材料雖然發光過程和發光機制不同，但因其均具有信噪比高、反斯托克位移大、熒光性能穩定以及穿透深度大等優勢被廣泛用作生物標記材料，同時以近紅外光作為激發光源或者成像信號，可以極大地降低生物組織的背景干擾，如自體熒光等，從而顯著提高檢測的靈敏度。因此，利用稀土摻雜的熒光納米材料標記Lp-PLA2單克隆抗體可快速有效的檢測出目標抗原，具有特異性，高靈敏度等優點。

發明內容

本發明的目的在于提供一種硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料的制備方法，該方法得到的材料可標記Lp-PLA2抗體用以定性檢測脂蛋白磷脂酶A2。

本發明的第二個目的在于提供一種硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料。

本發明的第三個目的在于提供一種基于硅烷氨基化修飾的上轉換熒光納米材料的Lp-PLA2檢測試劑。

本發明的第四個目的在于提供一種上述檢測試劑的制備方法。

為實現以上目的，本發明的技術方案是：