[發明專利]一種耐熱性的低溫外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3有效
| 申請號： | 201810582346.5 | 申請日： | 2018-06-07 |
| 公開（公告）號： | CN108715840B | 公開（公告）日： | 2019-09-20 |
| 發明（設計）人： | 張蕊;黃遵錫;周峻沛;何麗梅;韓楠玉;丁俊美;許波;唐湘華 | 申請（專利權）人： | 云南師范大學 |
| 主分類號： | C12N9/24 | 分類號： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京眾合誠成知識產權代理有限公司 11246 | 代理人： | 夏艷 |
| 地址： | 650500 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 突變體 耐熱性 外切菊粉酶 酶活 氨基酸序列 蛋白質改造 基因工程 生物能源 可水解 最適pH 果糖 菊粉 釀酒 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種耐熱性的低溫外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3，其特征在于，所述的突變體MutQ23Δ3的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.權利要求1所述的突變體MutQ23Δ3的編碼基因，其特征在于，所述的編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
3.包含權利要求2所述的編碼基因的重組載體。
4.包含權利要求2所述的編碼基因的重組菌。
5.權利要求1所述的耐熱性的低溫外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
1)在MutQ23Δ3編碼基因的5'端補加HRV3C蛋白酶酶切位點編碼序列，所述的MutQ23Δ3編碼基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示；
2)將1)中的序列與表達載體相連接，并將連接產物轉化大腸桿菌，獲得包含MutQ23Δ3編碼基因的重組菌株；
3)培養重組菌株，誘導重組外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3表達；
4)回收并純化所表達的重組外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3；
5)用HRV3C蛋白酶酶切重組外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3；
6)回收并純化外切菊粉酶突變體MutQ23Δ3；
7)活性測定。
6.權利要求1所述的突變體MutQ23Δ3在食品制備中的應用。
7.權利要求1所述的突變體MutQ23Δ3在釀酒工藝中的應用。
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