[發(fā)明專利]碳酸鈣的制備方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201810572720.3 | 申請(qǐng)日: | 2018-06-04 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN108841870A | 公開(kāi)(公告)日: | 2018-11-20 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 趙坤;宗奕吾;句穎;張文超 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 天津大學(xué) |
| 主分類號(hào): | C12P3/00 | 分類號(hào): | C12P3/00;C12R1/01 |
| 代理公司: | 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 11021 | 代理人: | 喻穎 |
| 地址: | 300354 天津市*** | 國(guó)省代碼: | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 碳酸鈣 培養(yǎng)基 巴氏芽孢八疊球菌 菌液 制備 微生物 菌株接種 稀釋菌液 振蕩培養(yǎng) 模板法 微環(huán)境 烘干 稀釋 尿素 去除 位點(diǎn) 取出 細(xì)菌 誘導(dǎo) 生長(zhǎng) 應(yīng)用 恢復(fù) | ||
1.一種碳酸鈣的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)配制細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基,滅菌后,加入過(guò)濾除菌的尿素,得到含尿素的培養(yǎng)基,將巴氏芽孢八疊球菌菌株接種入所述含尿素的培養(yǎng)基中,過(guò)夜振蕩培養(yǎng),得到巴氏芽孢八疊球菌菌液;
(2)配制鈣鹽溶液,過(guò)濾除菌后加入所述含尿素的培養(yǎng)基中,得到產(chǎn)碳酸鈣培養(yǎng)基,取步驟(1)制備的所述巴氏芽孢八疊球菌菌液,去掉培養(yǎng)基后加入新鮮液體培養(yǎng)基混懸,將混懸后的菌液加入所述產(chǎn)碳酸鈣培養(yǎng)基中,振蕩培養(yǎng),形成碳酸鈣;取出形成碳酸鈣后的菌液,徹底去除培養(yǎng)基,然后烘干制得微生物成因的碳酸鈣;
(3)取步驟(1)制備的巴氏芽孢八疊球菌菌液,去掉培養(yǎng)基后加入所述含尿素的培養(yǎng)基混懸,使得細(xì)菌微環(huán)境pH恢復(fù)至中性;使用所述產(chǎn)碳酸鈣培養(yǎng)基稀釋菌液至OD600為0.01~0.1,取步驟(2)得到的所述微生物成因的碳酸鈣加入稀釋后的菌液中得到新的碳酸鈣。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(1)中,所述細(xì)菌生長(zhǎng)的培養(yǎng)基為營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基或酵母提取物培養(yǎng)基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
所述營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的組成為:按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì),蛋白胨1%,牛肉膏1%,氯化鈉0.5%,硫酸銨1%。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
所述酵母提取物培養(yǎng)基的組成為:按質(zhì)量分?jǐn)?shù)計(jì),酵母粉2%,硫酸銨1%,三羥甲基氨基甲烷0.15%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
所述含尿素的培養(yǎng)基中,尿素的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(1)中,巴氏芽孢八疊球菌菌株培養(yǎng)的溫度為20~35℃,轉(zhuǎn)速為150~250rpm。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述鈣鹽溶液包括氯化鈣溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述形成碳酸鈣后的菌液徹底去除培養(yǎng)基的方法為:離心后去掉上清液,再使用超純水重懸,重復(fù)至少三次。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述微生物成因的碳酸鈣的烘干溫度為50~100℃。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的碳酸鈣的制備方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述產(chǎn)碳酸鈣培養(yǎng)基中鈣鹽的濃度≥25mmol/L。
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