[發(fā)明專利]一種崖柏烯、羅漢柏烯和α-雪松醇的分離制備方法

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201810570468.2
• 申請日: 2018-06-05
• 公開（公告）號: CN108853154A
• 公開（公告）日: 2018-11-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 郭琴
• 申請（專利權(quán)）人: 郭琴
• 主分類號: A61K36/14
• 分類號: A61K36/14;C07C13/547;C07C7/04;C07C7/12;C07C35/37;C07C29/80;C07C29/76
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本發(fā)明公開了一種基于高速逆流萃取法從崖柏中分離制備高純度單體崖柏烯、羅漢柏烯和α?雪松醇的方法。本發(fā)明以崖柏葉為原料，通過水蒸氣蒸餾法獲得揮發(fā)油樣品，采用高速逆流色譜萃取法進(jìn)行分離純化，得到單體崖柏烯、羅漢柏烯和α?雪松醇，所述的溶劑體系由正構(gòu)烷烴、乙酸乙酯或正丁醇和甲醇或乙醇構(gòu)成，本方法所得崖柏烯、羅漢柏烯和α?雪松醇純度分別高達(dá)93%、97%和96%以上。該方法可控性強(qiáng)，分離效果好，純度高，具有規(guī)模化制備前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種基于高速逆流色譜法從崖柏葉中分離制備高純度崖柏烯、羅漢柏烯和α-雪松醇的方法。

背景技術(shù)

崖柏(Thuja sutchuenensis)為柏科崖柏屬常綠喬木，為我國特有的珍稀瀕危植物。該物種在1892年被法國傳教士首次發(fā)現(xiàn)，曾被認(rèn)為是已滅絕的3種中國特有植物之一，1999年又被重新發(fā)現(xiàn)，分布在我國重慶市東北的城口縣大巴山自然保護(hù)區(qū)和開縣雪寶山自然保護(hù)區(qū)、四川省萬源市花萼山自然保護(hù)區(qū)和湖北省保康縣五道峽自然保護(hù)區(qū)(在甘肅天水地區(qū)也有發(fā)現(xiàn))。《本草綱目》中介紹柏有極高的藥理價值：“柏性后調(diào)而耐久，堅凝之質(zhì)，乃多壽之木，可以服……無毒，除風(fēng)濕，安五臟，久服，令人潤澤美色……興陽道，益壽，去百邪鬼魅，潤肝、養(yǎng)心氣，潤腎燥”。

研究表明，崖柏的根、莖、葉中含有多種萜類化合物，這些萜類化合物脂溶性強(qiáng)，分子量小，具有抗菌、抗氧化、抗腫瘤、降血壓、驅(qū)蟲、抗炎、利尿、祛痰、健身強(qiáng)體的功效。目前有從崖柏中提取崖柏精油，應(yīng)用于醫(yī)療保健、食品工業(yè)、果蔬保鮮、日用化妝品等領(lǐng)域。有報道，王亞琪等采用超臨界CO₂萃取崖柏精油，鑒定出羅漢柏烯、α-雪松醇和花側(cè)柏烯等28種萜烯類化合物。本發(fā)明主要從崖柏葉中提取精油化合物，其中羅漢柏烯、α-雪松醇具有明顯的抑菌作用，而關(guān)于高速逆流色譜制備分離還鮮于報道。目前對崖柏烯的研究多集中于定性分析，羅漢柏烯和α-雪松醇主要采用柱層析分離方法獲得，工藝復(fù)雜，制備量小。高速逆流色譜(High-speed Countercurrent Chromatography, HSCCC)是一種不需要任何固體支撐物的液-液色譜分離技術(shù)，避免了固態(tài)載體帶來的各種問題——樣品易被吸附、損耗和變性，HSCCC具有較高峰型分辨率、分離環(huán)境緩和、高效、快速、連續(xù)、回收率高和分離量大等優(yōu)點(diǎn)。HSCCC能直接分離大量粗提物樣品或合成混合物，分離結(jié)果能夠達(dá)到相當(dāng)高的純度。因此，HSCCC具有操作簡便，理論回收率為100％，重現(xiàn)性好和分離效率高、分離量較大的特點(diǎn)，已廣泛應(yīng)用于生物、醫(yī)藥、環(huán)保等領(lǐng)域化學(xué)物質(zhì)的制備分離和純化。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種單體崖柏烯、羅漢柏烯和α-雪松醇的制備方法，其克服了固態(tài)支持物或載體不可逆吸附、損耗和變性，使分離回收率提高，且節(jié)約溶劑、操作簡便。

本發(fā)明的方案是：經(jīng)水蒸氣蒸餾法從崖柏葉中獲得的揮發(fā)油物質(zhì)，通過高速逆流色譜法進(jìn)行分離純化，獲得崖柏烯、羅漢柏烯和α-雪松醇。選擇的溶劑體系由3個組分構(gòu)成，A組分為正構(gòu)烷烴，B組分為乙酸乙酯或正丁醇，C組分為甲醇或乙醇，A、B、C三組分的體積比為5:（2-4）:（1-4），以上相作為固定相，下相作為流動相。

所述正構(gòu)烷烴選自正戊烷、正己烷、正庚烷中的至少一種。

首先在分液漏斗中按適當(dāng)?shù)谋壤渲粕鲜瞿媪魅軇w系，搖勻后靜置分層。將揮發(fā)油溶于適量流動相中待用，進(jìn)樣前先用固定相充滿整個逆流色譜儀管路，然后使柱子轉(zhuǎn)動，調(diào)節(jié)逆流主機(jī)轉(zhuǎn)速為800-1000r/min，以0.5-3.0mL/min的流速將流動相泵入管路，當(dāng)固定相和流動相在主機(jī)中建立動態(tài)平衡后，由進(jìn)樣閥進(jìn)入制備好的粗提物，根據(jù)檢測譜圖接收目標(biāo)成份。