[發(fā)明專利]一種弧菌H11及其應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810563945.2
• 申請日: 2018-06-04
• 公開（公告）號: CN108753643B
• 公開（公告）日: 2022-06-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡忠;李進;徐艷;鐘名其;林賢彬
• 申請（專利權(quán)）人: 汕頭大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P19/02;C12R1/63
• 代理公司: 廣州三環(huán)專利商標(biāo)代理有限公司 44202
• 代理人: 張澤思;曹江

本發(fā)明涉及一種弧菌H11及其應(yīng)用，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號為CCTCC NO：M 2018172。本發(fā)明篩選到一株高效水解滸苔多糖的菌株，且它水解獲得的還原糖能夠被能源菌株利用生成生物能源物質(zhì)，與現(xiàn)有的水解滸苔多糖的單一菌株相比較，本發(fā)明中的弧菌H11的水解能力最強。本發(fā)明通過弧菌的水解與梭菌的厭氧發(fā)酵相結(jié)合，從而實現(xiàn)滸苔的高值化利用。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明微生物生物技術(shù)和資源生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種弧菌H11及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

滸苔(Enteromorpha)是一種大型綠藻，屬于綠藻門(Chlorophyta)石莼目(Ulvales)石莼科(Ulvaceae)的植物。近年來由于全球變暖、海水富營養(yǎng)化，導(dǎo)致滸苔迅速生長，對海洋生態(tài)環(huán)境帶來了極大的影響。早期對滸苔的填埋和焚燒，對周圍的水體和土壤造成了嚴(yán)重污染，且造成了生物質(zhì)資源的浪費。如何有效利用滸苔這一爆發(fā)性資源，已成為改善海洋生態(tài)環(huán)境和海藻綜合利用的研究熱點。

滸苔作為一種大型綠藻是一種潛在的可再生的生物燃料源，可用于制取生物油、沼氣或乙醇等。然而由于滸苔多糖成份復(fù)雜且尚不清楚，導(dǎo)致研究者們對于滸苔的高值化利用的研究還比較少，對滸苔及滸苔多糖在活性寡糖或生物能源方面在應(yīng)用還是很少。目前，對滸苔的處理方法主要有水熱法、快速熱解法和發(fā)酵法。但水熱法和快速熱解法獲得的燃油很難被直接被利用；所以，微生物酶法受到廣大研究者的青睞。在當(dāng)前用于微生物產(chǎn)醇類、酸類的主要碳源為葡萄糖、木糖、果糖等單糖類，其成本太高。但滸苔這一爆發(fā)性資源可被水解成可發(fā)酵還原糖，作為一種新型的產(chǎn)生物能源在原料。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種弧菌H11及其應(yīng)用，以解決目前滸苔多糖成份復(fù)雜且尚不清楚，導(dǎo)致研究者們對于滸苔的高值化利用的研究還比較少，所以研究滸苔利用的方案比較單一，目前主要是物理化學(xué)的方法，其方法具有很大的局限性等問題。

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種弧菌H11(Vibrio sp.H11)，于2018年3 月31日保藏于“中國典型培養(yǎng)物保藏中心”，其保藏編號為：CCTCC NO：M 2018172，保藏單位地址為：湖北省武漢市武昌區(qū)八一路299號武漢大學(xué)保藏中心。該發(fā)明菌株能以滸苔多糖為唯一碳源的培養(yǎng)基中生長，且其為革蘭氏染色陰性菌；生理生化特征具有VP陽性，MR陽性，明膠液化陰性。能以“綠潮”滸苔生物質(zhì)作為唯一碳源和能源生長并水解成梭菌可發(fā)酵的還原糖，用于厭氧發(fā)酵生成生物氫氣和生物有機溶劑等。

上述弧菌H11的培養(yǎng)方法為：將所述弧菌H11菌接種到滸苔多糖為唯一碳源生長，培養(yǎng)基組成為(1L)(NH₄)₂SO₄，1.0g；Na₂HPO₄，0.8g；KH₂PO₄， 0.2g；MgSO₄·7H₂O，0.2g；CaCl₂·2H₂O，0.1g；FeCl₃·6H₂O，5mg； (NH₄)₆Mo₇O₂₄·4H₂O，1mg；ddH₂O 1L；滸苔多糖，20g；胰蛋白胨，5g/L中，在溫度為30℃，pH為8.71培養(yǎng)12h。培養(yǎng)基先在121℃滅菌20min。

弧菌H11的應(yīng)用，可用于水解“綠潮”生物質(zhì)。主要用于將滸苔水解為成梭菌可發(fā)酵的還原糖。弧菌H11將滸苔中的滸苔多糖水解為還原糖后梭菌的厭氧發(fā)酵轉(zhuǎn)化為生物能源物質(zhì)。應(yīng)用方法主要包括：在含有滸苔粉末或滸苔多糖的厭氧發(fā)酵培養(yǎng)基中加入含有所述弧菌H11的濃縮的粗酶液，并40℃、200rpm 搖床中水解48h。再接種梭菌厭氧發(fā)酵。梭菌可以為Clostridium acetobutylicum WA菌株。