[發(fā)明專利]一種含芽孢桿菌的微生物液體肥及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201810562169.4
• 申請日: 2018-06-04
• 公開（公告）號: CN108676755B
• 公開（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 林斌;黃菊青;徐慶賢;鄭怡;錢蕾;官雪芳;張臣心
• 申請（專利權(quán)）人: 福建省農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/10;C12R1/125
• 代理公司: 石家莊國域?qū)＠虡耸聞?wù)所有限公司 13112
• 代理人: 白利霞;白海靜

1.一種含芽孢桿菌的微生物液體肥，其特征在于，所述液體肥為含有活菌數(shù)為2.0×10⁸cfu/ml ~2.5×10⁸ cfu/ml的芽孢桿菌的發(fā)酵液，所述芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌的混合菌，所述地衣芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）W205，該菌株于2016年8月8日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC No.12817；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）W309，該菌株于2016年8月8日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC No.12815。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含芽孢桿菌的微生物液體肥，其特征在于，在所述液體肥中添加有機酸，所述有機酸和液體肥的質(zhì)量比為0.01~2.0%。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含芽孢桿菌的微生物液體肥，其特征在于，所述有機酸為甲酸、乙酸或檸檬酸中的任意一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的含芽孢桿菌的微生物液體肥，其特征在于，所述地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）W205的菌體呈桿狀，長為2.0~3.0 μm，寬為0.3~0.5 μm；所述枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）W309的菌體呈桿狀，長為1.0~3.0 μm，寬為0.5~0.8 μm。

5.一種含芽孢桿菌的微生物液體肥的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（a）將地衣芽孢桿菌接種到LB培養(yǎng)基中，在33℃恒溫搖床中，180 r/min 振蕩培養(yǎng)24h，制成地衣芽孢桿菌液體種子；所述地衣芽孢桿菌為地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）W205，該菌株于2016年8月8日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC No.12817；

（b）將枯草芽孢桿菌接種到LB培養(yǎng)基中，在33℃恒溫搖床中，180 r/min 振蕩培養(yǎng)24h，制成枯草芽孢桿菌液體種子；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）W309，該菌株于2016年8月8日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號為：CGMCC No.12815；

（c）按質(zhì)量體積比為3%的接種量將所述枯草芽孢桿菌液體種子接種于發(fā)酵罐中的發(fā)酵培養(yǎng)基中，曝氣，于33℃下發(fā)酵12 h，再將地衣芽孢桿菌液體種子按質(zhì)量體積比為3%的接種量接種于所述發(fā)酵罐的發(fā)酵液中，曝氣，于33℃下混合發(fā)酵，在發(fā)酵過程中補充發(fā)酵培養(yǎng)基，發(fā)酵72 h，收集發(fā)酵液，獲得含芽孢桿菌的微生物液體肥。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的微生物液體肥的制備方法，其特征在于，在（c）制備的發(fā)酵液中添加有機酸，所述有機酸的添加質(zhì)量為發(fā)酵液質(zhì)量的0.01~2.0%，得含芽孢桿菌的微生物液體肥。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的含芽孢桿菌的微生物液體肥的制備方法，其特征在于，所述有機酸為甲酸、乙酸或檸檬酸中的任意一種。

8.根據(jù)權(quán)利要求5、6或7所述的微生物液體肥的制備方法，其特征在于，所述發(fā)酵培養(yǎng)基是以馬鈴薯淀粉廠的淀粉廢水為原料、添加豆粕粉10~30 g/L、調(diào)節(jié)pH值為6.0~8.0、滅菌得到的液體培養(yǎng)基。

9.一種權(quán)利要求1、2或3所述的含芽孢桿菌的微生物液體肥在茶葉生產(chǎn)中的應(yīng)用。