[發明專利]一種紅芪多糖修飾方法及修飾的紅芪多糖的應用

有效

• 申請號: 201810560882.5
• 申請日: 2018-05-25
• 公開（公告）號: CN108892733B
• 公開（公告）日: 2021-04-30
• 發明（設計）人: 趙良功;封士蘭;楊秀艷
• 申請（專利權）人: 蘭州大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P1/16;A61P19/10;A61P1/04;A61P3/10;A61P39/06;A61P37/02
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 席勇

本發明提供一種紅芪多糖修飾方法，首先，將紅芪用復合酶酶解；然后，進行超聲處理；最后，用乙醇沉淀；所述復合酶由纖維素酶和木瓜蛋白酶組成；所述用乙醇沉淀是加乙醇使乙醇體積濃度達到30?85％。本發明提供了一種紅芪多糖的修飾方法，通過一種酶解和超聲結合的分子修飾技術，有效地提高了紅芪多糖得率、純度和水溶性；使用該方法可使紅芪多糖發生降解、接枝和交聯反應，進而使多糖分子量降低、空間構象發生改變，提高了多糖的生物活性，是一種簡單方便、經濟環保、效率高、能耗低、無污染的修飾技術。使用本發明的方法修飾的紅芪多糖具有抗肝損傷、抗肝纖維化、抗骨質疏松、抗胃潰瘍、降血糖、抗衰老、抗氧化、提高免疫力等生物活性。

技術領域

本發明涉及一種簡單方便、經濟環保的分子修飾技術，即復合酶聯合超聲修飾紅芪多糖的方法，本發明還涉及該修飾的紅芪多糖的應用。

背景技術

現今，隨著糖技術及糖科學的飛速發展，低毒、無殘留、不產生耐藥性且活性顯著的多糖已成為研究熱點。已經證實中藥多糖具有促進免疫調節、抗腫瘤、抗病毒、抗氧化、抗炎、抗應激、抗輻射及抗衰老等多種生物活性。研究發現，多糖的生物活性與多糖的空間結構、分子量、單糖組成、提取方式及分子構象等密切相關。中藥多糖采用分子修飾技術，如化學修飾、酶修飾、物理修飾等，其空間結構發生了改變，產生新的構象，其物理化學性質、生物活性隨之改變，可以增強或者賦予中藥多糖更多的藥理活性和減弱其毒性，因此對中藥多糖進行分子修飾已經成為藥學研究和應用的一種常用的改良方法。

紅芪多糖(Hedysarum polysaccharides，HPS)是紅芪的主要藥效成分，具有降血糖、抗骨質疏松、抗肝纖維化、抗胃潰瘍、抗衰老、抗氧化、提高免疫力抗凝血和抗補體等藥理作用。目前，提取紅芪多糖的常用方法是熱水浸提法，該法提取率低、得到的多糖純度低、溶解度差、分子質量和體積較大，易形成黏度高、溶解度低的復合物，不利于多糖分子跨越細胞膜障礙進入生物體內發揮多糖的功能特性和生物活性。

發明內容

為了解決現有傳統的熱水浸提法存在的問題：提取率低、溶解度差、后期純化困難，且所得天然結構的多糖，分子質量和體積較大，存在黏度高、溶解度低，生物利用度差等缺陷。本發明提供了一種復合酶聯合超聲的分子修飾紅芪多糖的方法，因植物細胞壁由纖維素、果膠和結構蛋白等通過共價鍵和非共價鍵形成的多層纖維結構，利用纖維素酶可以使細胞壁疏松、破裂和減小傳質阻力，且蛋白酶能有效酶解與多糖結合在一起的蛋白質，從而促進細胞壁多糖和胞內多糖的溶出，同時降低了多糖中蛋白質的含量，提高多糖的純度；而超聲波可利用其空化作用和機械振動、乳化、擊碎、熱效應等次級效應使溶媒滲入細胞，加速有效成分的溶解。經復合酶聯合超聲修飾的紅芪多糖，可引起多糖發生降解、接枝和交聯反應，進而使多糖分子的大小、空間構象發生改變，在水中的溶解度增加，從而提高了生物活性。

本發明提供一種紅芪多糖修飾方法，首先，將紅芪用復合酶酶解；然后，進行超聲處理；最后，用乙醇沉淀；所述復合酶由纖維素酶和木瓜蛋白酶組成；所述用乙醇沉淀是加乙醇使乙醇體積濃度達到30-85％；

作為優選，所述用乙醇沉淀是加乙醇使乙醇體積濃度達到50-85％；

作為優選，所述紅芪用復合酶酶解前進行脫脂處理。

作為優選，所述復合酶中纖維素酶與木瓜蛋白酶的質量比為5:1-1:5；

作為優選，所述復合酶中纖維素酶與木瓜蛋白酶的質量比為2:1。

作為優選，所述將紅芪用復合酶酶解時，酶解溫度為40-55℃，酶解時間為1-6h，pH值為3-7；復合酶的添加量是紅芪質量的0.5-6.0％；

作為優選，所述將紅芪用復合酶酶解時，酶解溫度為45℃，酶解時間為1h，pH值為5；復合酶的添加量是紅芪質量的1.0％。

作為優選，所述超聲時，超聲溫度為30-70℃，超聲功率為40-115W，超聲時間為20-80min，超聲處理1-5次；