[發明專利]基于介電泳的細胞篩選裝置及其篩選方法

在審

• 申請號: 201810557181.6
• 申請日: 2018-06-01
• 公開（公告）號: CN108587902A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 王俊生;姜宗
• 申請（專利權）人: 大連海事大學
• 主分類號: C12M1/42
• 分類號: C12M1/42;C12N5/09
• 代理公司: 大連東方專利代理有限責任公司 21212
• 代理人: 趙淑梅;李馨

1.一種基于介電泳的細胞篩選裝置，其特征在于：包括ITO玻璃基底層(1)、3D電極層(4)、PDMS蓋片層(13)；

所述ITO玻璃基底層(1)設有兩排ITO電極，包括ITO電極Ⅰ(2)與ITO電極Ⅱ(3)，作為電源線與3D電極層(4)之間的導線；

所述3D電極層(4)積淀在ITO玻璃基底層(1)，與ITO玻璃基底層(1)的ITO電極相連；所述PDMS蓋片層(13)與積淀3D電極層(4)的ITO玻璃基底層(1)鍵合；

所述3D電極層(4)由兩排3D電極組成，其中一排3D電極由第二組3D電極(6)、第四組3電極(8)、第六組3D電極(10)、第八組3D電極(12)組成；另一排3D電極由第一組3D電極(5)、第三組3D電極(7)、第五組3D電極(9)、第七組3D電極(11)組成，所述3D電極層(4)的兩排3D電極分別與ITO玻璃基底層(1)的兩排ITO電極對應連接；

所述PDMS蓋片層(13)一端設有與液體注射泵相連的圓形入口腔(14)，中間為分離通道(18)，另一端設有圓形出口腔Ⅰ(15)、圓形出口腔Ⅱ(16)和圓形出口腔Ⅲ(17)，所述圓形入口腔(14)、圓形出口腔Ⅰ(15)、圓形出口腔Ⅱ(16)和圓形出口腔Ⅲ(17)為敞口式。

2.根據權利要求1所述基于介電泳的細胞篩選裝置，其特征在于：所述ITO電極Ⅰ(2)與ITO電極Ⅱ(3)厚度均為200nm。

3.根據權利要求2所述基于介電泳的細胞篩選裝置，其特征在于：所述3D電極層(4)中第一組3D電極(5)、第四組3D電極(8)、第五組3D電極(9)、第八組3D電極(12)均是由大小相同的四個小長方體電極組成；第二組3D電極(6)、第三組3D電極(7)、第六組3D電極(10)、第七組3D電極(11)均是由相同的大長方體電極組成。

4.根據權利要求1所述基于介電泳的細胞篩選裝置，其特征在于：所述3D電極層(4)中兩排3D電極之間間距為70um～150um，每組3D電極之間間距為70um～200um，3D電極層(4)厚度30um～60um。

5.根據權利要求1所述基于介電泳的細胞篩選裝置，其特征在于：所述第一組3D電極(5)、第四組3D電極(8)、第五組3D電極(9)、第八組3D電極(12)中每個小長方體電極寬70um～120um長1mm～2mm，小長方體電極之間間距70um～120um；第二組3D電極(6)、第三組3D電極(7)、第六組3D電極(10)、第七組3D電極(11)的寬490um～840um長1mm～2mm。

6.一種利用上述1-5中任意一項所述的裝置的篩選方法，其特征在于：包括如下步驟：

A、將細胞樣品溶液放入離心管中通過離心處理，加入緩沖液，搖勻，重復多次，得到細胞懸液，將該細胞懸液以實驗緩沖液稀釋至所需濃度；

B、通過注射泵中抽入實驗緩沖液，通過導管連接分離芯片的圓形入口腔(14)，注入分離通道(18)中，排凈分離通道(18)中的空氣；

C、通過注射泵中抽入處理后的細胞懸液，通過導管連接分離芯片的圓形入口腔(14)，注入分離通道(18)中，同時開啟信號源，通過調節電壓與頻率，使目標細胞從圓形出口腔Ⅰ(15)、圓形出口腔Ⅲ(17)流出，非目標細胞從圓形出口腔Ⅱ(18)，從而實現細胞的分離。